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1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文美國紅梣(Fraxinus pennsylvanica March.)抗菌肽活性物質(zhì)的篩選及研究姓名:陳彤彤申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:樊守金20060520山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文美國紅棒( F r a x i n u s p e n n s y l v a n i c aM a r s h .) 抗菌肽活性物質(zhì)的篩選及研究中文摘要植物在生長過程中需要從富含微生物的環(huán)境中獲取全部營養(yǎng)物質(zhì),但它們卻很
2、少被微生物感染。這是因為植物在長期進(jìn)化過程中形成了各自特有的抗菌途徑,例如,為了抵御病原微生物的感染,植物合成了多種具有抗菌作用的次生代謝產(chǎn)物或多肽。抗菌肽( a n t i m i c r o b i a l p e p t i d e s ,A M P s ) 在植物防御反應(yīng)中扮演非常重要的角色。抗菌肽廣泛存在于植物、動物和微生物體內(nèi),人們最早于1 9 6 5 年從蜜蜂毒液中分離得到,現(xiàn)在已經(jīng)在微生物、昆蟲、脊椎動物以及植物中分離得
3、到了多種抗菌肽并對它們進(jìn)行了深入的研究。根據(jù)抗菌肽作用位點及抗菌機(jī)理的不同,可以分成三類。作用于微生物細(xì)胞壁的抗菌肽通過干擾葡聚糖、幾丁質(zhì)等微生物細(xì)胞壁組成物質(zhì)的正常合成來抑制微生物的生長,如植物中發(fā)現(xiàn)的H e v e i n 類和K n o t t i n 類抗菌肽即屬此類。而作用于微生物質(zhì)膜的抗菌肽則通過生理條件下帶有正電荷且具有兩親性的特點與微生物細(xì)胞結(jié)合,并插入到質(zhì)膜中,在膜上形成穿膜孔洞使得細(xì)胞物質(zhì)外泄或激活離子通道使微生物細(xì)
4、胞離子比例失調(diào),從而抑制微生物的生長。此類抗菌肽數(shù)量眾多,如防衛(wèi)素類、M a g a i n i n s 、乳鏈菌肽等都是典型的作用于微生物質(zhì)膜的抗菌肽。第三類抗菌肽主要是通過啟動脅迫相關(guān)基因、絮凝細(xì)胞內(nèi)含物、抑制某些細(xì)胞器的作用、抑制核酸合成或蛋白質(zhì)的合成來發(fā)揮抗菌活性的,如各種核糖體失活蛋白和蛋白酶抑制劑等。本文通過凝膠過濾層析和反相高效液相色譜相結(jié)合的方法對美國紅豐岑果實水浸提液中的抗菌肽進(jìn)行了分離純化,得到了分子量小于S e p
5、 h a d e xG 一1 5 凝膠排阻分子量15 0 0 D a 的小分子抗菌肽。通過L C /E S I —M S 液質(zhì)聯(lián)用法對該物質(zhì)進(jìn)行了初步分析,根據(jù)其正離子采集模式下的譜圖推測該物質(zhì)的分子量約為9 2 7 .4 D a ,其氨基酸組成可能為L y s ,A s p ,P r o ,G l y ,I l e ( L e u ) ,G l y ,G l u ,P r o ,B c Z 。確切的分子量及氨基酸序列有待于進(jìn)行進(jìn)一步的
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