基于HPLC-ICP-MS技術(shù)分析動(dòng)物源性食品中砷制劑殘留表征和標(biāo)示物研究.pdf

1、砷是一種毒性物質(zhì)，研究報(bào)道其與多種癌癥及疾病的發(fā)病有關(guān)，國(guó)際癌癥研究委員會(huì)已將無(wú)機(jī)砷列為強(qiáng)致癌性物質(zhì)。砷的毒性不僅與總砷含量有關(guān)，還與元素存在的化學(xué)形態(tài)密切相關(guān)。目前我們對(duì)砷的研究還停留在對(duì)總量的檢測(cè)，已不能正確評(píng)價(jià)砷對(duì)人類的危害。研究食品中砷的形態(tài)分離分析技術(shù)，用以監(jiān)測(cè)砷的污染和殘留問題已成為當(dāng)務(wù)之急。
　　 本論文采用高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)同時(shí)分析動(dòng)物源性食品中洛克沙砷、阿散酸和硝苯胂酸，并對(duì)前處理方法進(jìn)

2、行了改進(jìn)。分別采用甲醇水溶液和人工胃液酶對(duì)樣品進(jìn)行前處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)甲醇水溶液比例為1∶9時(shí)提取效果最好，人工胃液酶解法也能達(dá)到相同效果。由于甲醇有毒，最終采用人工胃液酶解法。
　　 利用高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，建立了同時(shí)分析動(dòng)物源性食品中7種砷形態(tài)的檢測(cè)方法，前處理方法中引進(jìn)了人工胃液酶解法，解決了采用甲醇-水提取高蛋白樣品基質(zhì)時(shí)亞砷酸根回收率低的問題。采用梯度洗脫方式實(shí)現(xiàn)7種砷形態(tài)的良好分離。
　　

3、 通過飼養(yǎng)添加實(shí)驗(yàn)，對(duì)動(dòng)物（三黃雞）肌肉、肝臟、皮膚和血液中洛克沙砷、阿散酸及其代謝物進(jìn)行測(cè)定，確定動(dòng)物體內(nèi)各組織中砷制劑及其代謝物的殘留表征和殘留標(biāo)示物，同時(shí)進(jìn)行動(dòng)物肝臟病理學(xué)檢驗(yàn)和血液生化指標(biāo)的測(cè)定。研究結(jié)果:①代謝物種類:阿散酸添加組中各組織部位殘留的主要砷形態(tài)均為阿散酸、二甲基砷和亞砷酸根;洛克沙砷添加組主要有洛克沙砷、一甲基砷、二甲基砷、亞砷酸根和砷酸根，代謝物種類多于阿散酸，并且在不同組織部位的各砷形態(tài)所占比例的差異性很大;

4、②代謝速度:肝臟和血液中代謝速度較快，皮膚中最慢。同濃度水平阿散酸代謝快，相對(duì)較為徹底，洛克沙砷代謝物較為復(fù)雜，代謝速度慢，總體藥物殘留量要高于阿散酸;③殘留表征:阿散酸添加組各組織部位殘留表征均為阿散酸、二甲基砷和亞砷酸根;洛克沙砷添加組肌肉中為洛克沙砷、二甲基砷和亞砷酸根，肝臟中為洛克沙砷、二甲基砷、亞砷酸根和一甲基砷，血液中為洛克沙砷、二甲基砷、亞砷酸根和砷酸根;④殘留標(biāo)示物:初步確定為二甲基砷和亞砷酸根。⑤肝臟病理學(xué)檢驗(yàn):添加濃

5、度越高，肝臟的病變癥狀越明顯。高濃度添加組肉眼可見嚴(yán)重腫脹，并有明顯的出血變化。⑥血液生化指標(biāo)測(cè)定:提高雞血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶的活性，添加濃度越高作用越明顯，其中對(duì)谷丙轉(zhuǎn)氨酶的影響最顯著。
　　 運(yùn)用本論文所建立的7種砷形態(tài)檢測(cè)方法，對(duì)果蔬、水產(chǎn)品等食品進(jìn)行檢測(cè)，建立了高效性液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定食品（肉制品、果蔬及水產(chǎn)品）中6種砷形態(tài)的檢測(cè)方法。
　　 本論文以形態(tài)分析為主要研究

6、手段，改進(jìn)了檢測(cè)動(dòng)物源性食品中洛克沙砷、阿散酸和硝苯胂酸方法(HPLC-ICP-MS)中的前處理技術(shù);建立了同時(shí)分析動(dòng)物源性食品中7種砷形態(tài)的檢測(cè)方法(HPLC-ICP-MS);延展應(yīng)用建立了食品中6種砷形態(tài)的檢測(cè)方法(HPLC-ICP-MS);較為系統(tǒng)地對(duì)砷制劑及其在動(dòng)物體內(nèi)的代謝物進(jìn)行了研究，確定動(dòng)物體內(nèi)各組織中砷制劑及其代謝物的殘留表征和殘留標(biāo)示物，填補(bǔ)了國(guó)際國(guó)內(nèi)該領(lǐng)域研究的空白，為動(dòng)物源性食品的順利出口及檢驗(yàn)檢疫的執(zhí)法把關(guān)提供了