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
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文檔簡介
1、該文采用報告基因分析的方法,構(gòu)建了SRY基因5'旁側(cè)具有啟動效應(yīng)的544bp以內(nèi)不同長度片斷與熒光素酶報告基因載體pGL<,2>-Enhancer的重組子,并通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)導(dǎo)入Hela細(xì)胞,檢測其瞬間表達,由此分析啟動子不同模塊對基因轉(zhuǎn)錄效率的影響.結(jié)果顯示:位于起始密碼子ATG上游-353~-174之間的179bp片斷內(nèi)含有某種抑制子元件,-112~-63之間的49bp片斷內(nèi)含有某種增強子元件,而-174~-112之間的63bp片
2、斷中包含有基因轉(zhuǎn)錄所必需的啟動子序列.其具體的作用機制有待進一步研究.另外,544bp SRY啟動子片斷中包含有數(shù)個潛在的SRY蛋白結(jié)合位點,為研究SRY蛋白是否具有自身反饋調(diào)節(jié)作用,該文構(gòu)建了SRY蛋白的真核表達載體SRYpcDNA3,與544bp SRY啟動子片段的報告基因載體pGL544共轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,檢測pGL544的轉(zhuǎn)錄活性是否有改變.結(jié)果顯示:SRY蛋白可以輕度激活其自身啟動子的活性,提示SRY蛋白可能正調(diào)控其自身的表達
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