簡介：成都中醫(yī)藥大學博士學位論文小兒腹瀉癥證方藥規(guī)律及其氣陰兩虛證的生物學基礎研究姓名趙瓊申請學位級別博士專業(yè)中醫(yī)診斷學指導教師嚴石林201005成都中醫(yī)藥大學2010屆博士研究生學位論文2因的表達（P＜005或001）。研究結論1通過文獻研究，從癥狀、證候、藥物、癥證、藥證等多個維度初步揭示了小兒腹瀉病的癥證方藥規(guī)律，完善了對小兒腹瀉中醫(yī)證治規(guī)律的認識。提出了目前小兒腹瀉氣陰兩虛證日益增多；小兒腹瀉氣陰兩虛證的病因病機特點；認為氣陰兩傷是貫穿小兒腹瀉病程的基本病機；其臨床表現(xiàn)有急性氣陰兩虛和慢性氣陰兩虛之別；治療全過程當重視益氣養(yǎng)陰、生津止瀉。2通過實驗研究初步得出，血清電解質的紊亂（K、NA、CL含量降低），代謝性酸中毒（TCO2的含量降低，血清AG的含量增高）、腸蠕動亢進、腸擴張、絨毛水腫、炎細胞浸潤、上皮細胞脫落和AQP4及其活性調(diào)控關鍵因子PKC、ATPASE基因低表達是小兒腹瀉氣陰兩虛證的生物學基礎之一。關鍵詞小兒腹瀉氣陰兩虛證癥證方藥規(guī)律生物學基礎

簡介：白星花金龜PROTAETIALIOCOLABREVITARSISLEWIS是一種常見昆蟲，其幼蟲為腐食性，在自然界中可以取食腐爛的秸稈、雜草以及畜禽糞便等，針對此特點，本論文在對其形態(tài)、主要生物學特性以及腸道細菌等進行研究的基礎上，對其幼蟲取食玉米秸稈進行了研究，并對取食玉米秸稈的幼蟲資源成分進行了測定及評價，以期為白星花金龜幼蟲轉化處理玉米秸稈提供理論依據(jù)。主要研究結果如下1、白星花金龜?shù)纳L發(fā)育要經(jīng)歷卵、幼蟲、蛹和成蟲4個階段，屬于完全變態(tài)的昆蟲。白星花金龜雄成蟲體長1875±261MM，寬972±071MM，雌成蟲體長2090±272MM，寬1102±103MM。雌、雄蟲的主要區(qū)別是雄蟲觸角鰓片部較長而雌蟲則較短雄蟲前足脛節(jié)外緣3齒較為鋒利，而雌成蟲3齒除中間齒較為鋒利外，其余兩齒均較鈍雌性個體一般比雄性大。卵乳白色，圓形或橢圓形，長約185±015MM。幼蟲為咀嚼式口器，頭部褐色，體向腹面彎曲呈C字形，背面隆起多橫皺紋，背面及腹面均為白色。蛹為金黃色，橢圓形，長2150±221MM，寬1132±076，中部一側稍突起。2、白星花金龜在山東泰安地區(qū)1年1代，以老熟幼蟲在玉米秸稈堆垛、菌渣、雞糞等腐殖質中越冬，偶見有成蟲越冬。成蟲在5月中下旬到到10月中旬活動，5月下旬開始產(chǎn)卵。在溫度為28℃，含水量為15％時，卵的孵化率最高，達到8333±577％，卵期為813±0096D。幼蟲3齡，1齡期1456±065D，頭殼寬度139±024MM2齡期3361±123D，頭殼寬度230±015MM3齡期最長，為12832±231D，頭殼寬度421±062MM。白星花金龜成蟲在含水量為15％時產(chǎn)卵量最高，單雌平均產(chǎn)卵832±1699粒，產(chǎn)卵期60～85D。3、通過實驗確定了玉米秸稈的最佳腐解天數(shù)為25D，白星花金龜幼蟲最佳取食溫度為28℃各齡幼蟲在消化率、轉化率及利用率方面無顯著差異，30日齡3齡幼蟲取食玉米秸稈能力最強，單頭日取食量為05703±00405G分別為1齡幼蟲及2齡幼蟲的665和249倍，蟲糞產(chǎn)量達到04925±00301G，為各齡幼蟲中最高，可作為轉化處理玉米秸稈的最佳齡期，在密度為225GKG1時具有較好的轉化處理玉米秸稈效果。4、白星花金龜3齡幼蟲干物質中蛋白質及脂肪含量分別為4990％和1542％，為高蛋白昆蟲，氨基酸種類豐富，含有17種氨基酸，其中谷氨酸、脯氨酸和酪氨酸含量較高，包括8種必須氨基酸，必需氨基酸與非必需氨基酸的百分比為6511％，必需氨基酸與總氨基酸的百分比為3943％，蛋氨酸為其第一限制性氨基酸。必需氨基酸指數(shù)為8855，是一種良好蛋白源。幼蟲蟲糞呈橢圓形顆粒狀，干燥、無異味，體積小，含有有機質341％。無機元素氮含量為142％，P2O5含量為131％，K2O含量133％。5、利用常規(guī)分離培養(yǎng)方法從白星花金龜幼蟲腸道中分離純化獲得7株細菌菌株，對其生理生化性狀進行了系統(tǒng)研究，并結合16SRDNA技術對腸道分離菌株進行了鑒定。結果表明，分離純化得到的7株細菌，其中5株分別為堅強芽孢桿菌BACILLUSFIRMUS、環(huán)狀芽孢桿菌BACILLUSCIRCLANS、側孢芽孢桿菌BACILLUSLATEROSPUS、浸麻芽孢桿菌BACILLUSMACERANS和巨大芽孢桿菌BACILLUSMEGATERIUM，2株分別屬于韋榮氏球菌屬VEILLONELLA和明串球菌屬LEUCONOSTOC。

簡介：當今社會，知識更新速度越來越快，學生的自主學習能力可以幫助他們更好的適應時代發(fā)展的需求。傳統(tǒng)的講授式課堂很難有效提高學生的自主學習能力。在高中生物課堂中實施“說題”可以更好地調(diào)動學生在生物課堂上的積極性和主動性，提高課堂效率。研究通過問卷調(diào)查法對實施實驗的班級進行前后測，再通過數(shù)據(jù)統(tǒng)計的結果分析學生在實施“說題”課堂前后自主學習能力變化情況。在實驗前后各安排了一次訪談，通過訪談更深入的了解學生的情況。通過自主學習能力的前測發(fā)現(xiàn)，實驗班自主學習能力總體水平偏低。不同層次學生之間自主學習能力水平相差較大，學習內(nèi)容、學習環(huán)境、學習結果和學習動機等方面自主性較差，急需提高。該班學生對生物的學習興趣不高，缺乏生物學學習的主動性，學習自信心不足，克服內(nèi)外干擾的能力較差，缺乏有效地自我調(diào)控，學習的動機就是應付考試，很少將生物學知識與自己的現(xiàn)實生活相結合。根據(jù)前測中發(fā)現(xiàn)的問題進行針對實驗班的具體“說題”流程，在新授課和習題課中分別進行“說題”實踐。通過對該班學生自主學習能力前后測發(fā)現(xiàn)該班學生在自主學習能力各個維度方面的自主性普遍有所提升，特別是學習內(nèi)容和學習動機維度，平均得分率增長較多。由此可知，“說題”課堂對提高學生自主學習能力有較好的效果。通過訪談調(diào)查，反映“說題”課堂在實施過程中還存在許多問題，如課堂教學時間緊張，教師工作負荷較大，部分學生不適應“說題”課堂教學模式，研究樣本數(shù)較少，研究時間較短等問題。盡管如此，學生“說題”課堂可以較好的提高學生成績，提升學生自主學習能力，培養(yǎng)學生的生物科學素養(yǎng)等。

簡介：點擊查看更多不同白僵菌菌株生物學特性及其對馬尾松毛蟲毒力的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：BIOLOGICALCHARACTERISTICSANDCOMBININGABILITYANALYSISOFWENXUANRESTORERLINESINRICEORYZASATIVALBYMAGUOHUAATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTLALFULFILLMENTOFTHEREQULREMENTSFORMASTERDEGRE氣INAGRICULTURALEXTENSIONSUPERVISEDPROFDELINHONGNANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING210095，PRCHINANOVEMBER2012目錄目錄摘要ABSTRACTIII第一章文獻綜述。11前言。12水稻雜種優(yōu)勢利用現(xiàn)狀121水稻種質資源概況122水稻雜種優(yōu)勢的利用23水稻細胞質雄性不育恢復系研究進展431水稻細胞質雄性不育強優(yōu)勢恢復系的選育。432水稻細胞質雄性不育恢復系的品質改良533水稻細胞質雄性不育恢復系的抗性育種534水稻細胞質雄性不育恢復基因的遺傳635水稻細胞質雄性不育恢復基因的定位7L第二章水稻恢復系溫恢365和溫845的生物學特征。9L材料與方法911供試材料912田間種植與性狀考察一1013米質檢測和秈粳交親和性鑒定一1014褐飛虱抗性鑒定一102試驗結果與分析1021溫恢365生物學特征一1022溫恢845生物學特征一133討論14第三章溫選恢復系產(chǎn)量相關性狀配合力分析171材料和方法1811供試材料一1812田問試驗和統(tǒng)計方法182結果與分析19

簡介：分類號S4762單位代碼10389密級學號1100311福建農(nóng)林大學碩士學位論文福建農(nóng)林大學碩士學位論文甘蔗苗期蔗薊馬生物學甘蔗苗期蔗薊馬生物學、發(fā)生特點及、發(fā)生特點及藥效測定藥效測定學科門類農(nóng)學一級學科名稱植物保護學二級學科名稱農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治研究方向昆蟲生態(tài)與害蟲綜合治理研究生姓名余玲指導教師徐金漢教授羅佳教授完成時間二0一三年四月獨創(chuàng)性聲明獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位（畢業(yè)）論文，是本人在指導教師的指導下獨立完成的研究成果，并且是自己撰寫的。盡我所知，除了文中作了標注和致謝中已作了答謝的地方外，論文中不包含其他人發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同對本研究做出貢獻的同志，都在論文中作了明確的說明并表示了謝意，如被查有侵犯他人知識產(chǎn)權的行為，由本人承擔應有的責任。學位（畢業(yè)）論文作者親筆簽名日期論文使用授權的說明論文使用授權的說明本人完全了解福建農(nóng)林大學有關保留、使用學位（畢業(yè)）論文的規(guī)定，即學校有權送交論文的復印件，允許論文被查閱和借閱學?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文。保密，在年后解密可適用本授權書。□不保密，本論文屬于不保密?！鯇W位（畢業(yè)）論文作者親筆簽名日期指導教師親筆簽名日期

簡介：枸杞木虱成蟲在尋找、選擇寄主過程中視覺和嗅覺在寄主植物的定向中起到重要作用綠色和寄主揮發(fā)性氣味對它的引誘作用明顯在決定寄主取舍時枸杞木虱的嗅覺、觸覺和味覺綜合起作用此外寄外植物葉片的厚度、表面光滑程度等因素對它的選擇影響較大枸杞木虱若蟲的擴散能力較強而且不耐饑餓若蟲只有在受到環(huán)境脅迫葉片枯黃等下才爬行尋找寄主植物尋找寄主的過程主要靠觸覺和味覺來判別寄上的取舍枸杞木虱嚙小蜂TSP是枸杞木虱若蟲期的外寄生蜂該文首次對枸杞木虱嚙小蜂的生物學特性和寄生行為進行了研究枸杞木虱嚙小蜂將卵產(chǎn)于木虱若蟲的胸腹下面頭部鉆入寄主體內(nèi)取食卵期1220H平均為18H幼蟲期35天平均4天預蛹期46天平均45天蛹期68天平均7天在溫度為2327℃下完成一個世代需1420天平均為16天通過測定健康枸杞葉、受害枸杞葉、帶木虱若蟲的枸杞葉、枸杞木虱若蟲及卵、木虱若蟲分泌物等對枸杞木虱嚙小蜂尋找寄主行為的影響證明引誘枸杞木虱嚙小蜂尋找寄主的他感化合物源于枸杞木虱若蟲分泌物枸杞木虱若蟲分泌物的氨基酸及游離氨基酸測定表明分泌物中有16種氨基酸15種游離氨基酸游離氨基酸中沒有精氨酸分泌物中還含有24種脂溶性物質其中有16種直鏈烷烴及甲基丁子香酚、長葉烯、苯并噻唑、萘及三甲苯等化合物該文還對9種常發(fā)性害蟲主要生物學特性和防治方法做了介紹并對枸杞害蟲發(fā)生的原因進行了分析

簡介：本文分為以下幾個部分進行探討第一部分血維生素D與上尿路結石的相關性系統(tǒng)評價與薈萃分析背景和目的當前有眾多研究比較了結石和非結石患者血清血漿125OH2D3和25OHD水平，但是它們的結果并不一致，甚至相互矛盾。因而我們開展了這項研究以便系統(tǒng)地比較結石和非結石患者血維生素D水平的差異。方法系統(tǒng)檢索PUBMED，WEBOFSCIENCE，COCHRANE圖書館，中國知網(wǎng)和萬方數(shù)據(jù)庫，篩選納入文獻，并進行META分析。結果最終本研究共納入包含有23228名參與者的32項研究。META分析結果表明，相較于非結石對照者，結石患者和含鈣結石患者血125OH2D3水平顯著升高（加權均數(shù)差WMD1019PGML95％CI4311607P00007和WMD1128PGML95CI4071850P0002），但血25OHD水平相近（WMD088NGML95CI104280P037和WMD063NGML95CI272147P056）。與對照組和尿鈣正常結石患者相比，高鈣尿結石患者血125OH2D3升高（WMD941PGML95CI0151867P005WMD275PGML95CI020569P007）并伴隨25OHD血濃度升高（WMD502NGML95CI099906P001和WMD502NGML95CI214790P00006）。與非結石患者相比，尿鈣正常結石患者血125OH2D3水平升高（WMD685PGML95CI5001871P026）但無統(tǒng)計學差異，且兩者血25OHD濃度相近（WMD094NGML95CI355543P068）。進一步行敏感性分析得出與上述結果相似的結果。結論目前的證據(jù)表明血125OH2D3增加與泌尿結石相關，而血25OHD升高僅與高鈣尿結石顯著相關。尚需進一步研究確認上述結果并闡明維生素D在結石發(fā)病機制中的作用。第二部分基于維生素D通路激活構建高鈣尿結石大鼠模型背景和目的目前結石動物模型以高草酸尿動物模型為主，高鈣尿結石動物模型較少。經(jīng)典的遺傳性高鈣尿結石大鼠模型和一些可形成腎間質鈣化的基因敲除小鼠存在培育復雜和價格高昂的局限。相關研究顯示這些動物模型普遍存在維生素D通路激活的特點，并且我們先前的研究也證實結石病人存在血活性維生素D水平增高。因而我們擬通過單純給予SPRAGUEDAWLEY大鼠活性維生素D，嘗試建立一種相對簡便、經(jīng)濟、可重復的高鈣尿結石動物模型。方法取6周齡雄性SPRAGUEDAWLEY大鼠，隨機分為維生素D造模組（24只）、對照組（18只）和乙醛酸造模組（6只），正常飲食和飲水。維生素D造模組按100NG100G體重隔日腹腔注射2NGUL的125OH2D3溶液。在第2、4、8和12周時測量體重并測定24小時尿鈣。在第4周、8周和12周隨機處死8只大鼠，取血測定血鈣、血磷和肝腎功能等指標。留取腎臟，行HE和VONKOSSA染色觀察顯微結構以及鈣鹽沉積和結石形成情況，行掃描電鏡觀察超微結構，行MICROCT平掃和三維重建整體觀察腎臟鈣鹽沉積和結石形成情況。對照組大鼠除隔日腹腔注射對應劑量溶劑和定期處死6只大鼠外，其余處理和檢測指標與維生素D造模組相同。乙醛酸造模組大鼠按照10MG100G體重每日腹腔注射乙醛酸溶液，連續(xù)注射10天。10天后處死取腎臟行HE和VONKOSSA染色觀察其顯微結構以及及鈣鹽沉積和結石形成情況，并與維生素D造模組比較鈣鹽沉積的分布。結果維生素D造模組大鼠體重在第4至12周時顯著低于對照組大鼠，肝功能和腎功能指標在各周與對照組無明顯差異。維生素D組大鼠血鈣在各個時間點均顯著高于對照組，而血磷僅在第4周低于對照組。維生素D組尿鈣濃度以及24小時尿鈣均顯著高于對照組。維生素D造模組大鼠在第4周時，在MICROCT上偶見腎實質鈣鹽沉積；在第8周時，石蠟切片VONKOSSA染色在腎內(nèi)層髓質腎乳頭部位可見明顯鈣鹽沉積，腎盂可見結石形成，MICROCT可見明顯腎實質鈣化和結石形成；在第12周時，鈣化程度進一步加重。行掃描電鏡觀察見腎間質鈣化由小的板片狀或同心圓樣礦質沉積聚集而成，能譜分析顯示其成分主要包含鈣和磷元素；腎盂結石則中心結構較為疏松，外層包繞板層狀致密礦質結構，其成分亦包含鈣和磷元素。與維生素D造模組大鼠不同，乙醛酸造模組大鼠腎臟鈣鹽沉積主要位于皮質和髓質交界處，且鈣鹽沉積主要位于管腔內(nèi)。結論按100NG100G體重隔日腹腔注射125OH2D3可以誘導大鼠出現(xiàn)高鈣尿、腎間質磷酸鹽鈣化和腎盂結石。本模型可應用于腎間質鈣化和高鈣尿結石的研究，且優(yōu)化造模方法可進一步優(yōu)化。第三部分高濃度125OH2D3和CA2誘導腎間質鈣化和結石形成的生物學機制研究背景和目的RALL鈣斑是位于腎間質的鈣化，可能是腎結石形成的起始病變，而125OH2D3及其誘導的高鈣尿可以促進腎間質鈣化和腎結石形成。本研究擬進一步證實RALL鈣斑與結石的相關性，并探究高濃度125OH2D3和CA2促進腎間質鈣化和腎結石形成的生物學機制。方法基于腹部CT平掃影像學圖片，比較性別和年齡相匹配的結石患者和非結石患者腎乳頭密度（HU值），以進一步驗證RALL鈣斑理論?；诮Y石患者和非結石患者腎乳頭組織芯片數(shù)據(jù)，靶向分析與抑制異位鈣化相關基因包括基質GLA蛋白（MGP）、骨橋蛋白（OPN）、骨鈣素（OCN）、骨保護素（OPG）和富GLA蛋白（GRP）在結石患者和非結石患者腎乳頭的表達情況，進而確定本研究的核心分子。在動物和或細胞水平對上述核心分子基因表達情況及其功能進行驗證，并分析高鈣和高維生素D對細胞增殖、凋亡、氧化應激、細胞損傷修復以及細胞與晶體的相互作用等生物學功能的影響。結果最終納入性別和年齡相匹配的結石和非結石患者各50例，結石組患者腎乳頭密度均值顯著高于非結石患者（4981±712VS4098±568）。對26例草酸鈣結石患者和6例非腎結石對照者的腎乳頭組織基因芯片數(shù)據(jù)進行分析顯示，結石患者腎乳頭MGP表達下調(diào)315倍（P005），OPN、OPG、OCN和GRP表達分別上調(diào)193（P052）、116（P058）、157（P006）和204（P008）倍。免疫組織化學染色顯示造模組大鼠間質鈣化區(qū)域MGP染色強陽性，且鈣化周圍包繞著成纖維細胞特異蛋白1陽性細胞。進一步免疫組織化學染色和免疫印跡結果顯示造模組大鼠腎髓質MGP表達較對照組降低，細胞免疫熒光和免疫印跡研究發(fā)現(xiàn)高鈣和高維生素D抑制了腎小管上皮細胞MGP表達。茜素紅染色實驗發(fā)現(xiàn)高鈣和高維生素D可誘導大鼠腎成纖維細胞周圍出現(xiàn)鈣鹽沉積，而外源性補充濃度為01UGML或05UGML的MGP后，鈣化則明顯減少甚至消失。造模組大鼠腎組織脂質過氧化產(chǎn)物丙二醛顯著增高，TUNEL染色顯示腎小管細胞凋亡增多。CCK8細胞增殖實驗、流式細胞術、劃痕實驗以及晶體粘附實驗證實，高鈣高維生素D培養(yǎng)基可顯著抑制腎小管上皮細胞增殖、誘導腎小管上皮細胞凋亡，并抑制腎小管上皮細胞損傷修復能力，促進腎小管上皮細胞對一水草酸鈣晶體的粘附，但未促進其對磷酸鈣晶體的粘附。結論腎乳頭鈣化與結石密切相關，活性維生素D聯(lián)合其誘導的高鈣微環(huán)境可能通過下調(diào)MGP的表達，同時提高腎臟的氧化應激水平、促進腎小管上皮細胞凋亡、抑制腎小管上皮細胞增殖和損傷修復來促進間質鈣化產(chǎn)生和后續(xù)結石形成。

簡介：授予單位代碼10089學號或申請?zhí)?0143292中國圖書分類號R7352專業(yè)專業(yè)學位學位胃腸道間質瘤生物學特征及綜合診治的回顧性研究胃腸道間質瘤生物學特征及綜合診治的回顧性研究（附（附1260例報告）例報告）研究生韓笑天韓笑天導師李勇教授教授趙雪峰趙雪峰副教授副教授專業(yè)外科學外科學二級學院二級學院河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院2017年3月碩士學位論文HEBEIMEDICALUNIVERSITY

簡介：STUDYONBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFTHEPYRUVATEDEHYDROGENASEANDCONSTRUCTIONOFRANDOMMUTAGENESISVECTORFORMJCOPLAS地▲GALLISEPTICUMBYZHANGFANQINGDIRECTEDBYASSOCIATEPROFFEIRONGMEIANDPROFDINGCHANADISSERTATIONSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEMASTERDEGREEOFAGRONOMYVETERINARYMEDICINECOMPLETEDINMAY2014COMMENCEMENTINJUNE，2014目錄目錄摘要I縮略詞表第章1112131415第二章11121314ⅢV1丙酮酸脫氫酶的概述1丙酮酸脫氫酶的結構1丙酮酸脫氫酶復合體的催化機理3丙酮酸脫氫酶的功能4研究雞毒支原體丙酮酸脫氫酶的意義6支原體基因工程研究工具7轉座子7目的基因的敲除8報告基因9雞毒支原體隨機插入突變的研究意義一10第三章丙酮酸臉酶EL和E2亞基的原核表達及多抗制備L材料和方法。1311菌種、載體、抗體及動物一1312儀器1313試劑一1414雞毒支原體RLOW株基因組的提取1415PDHA和PDHB基因的OVERLAPPCR擴增1416重組表達載體的構建。1517目的基因的原核表達和蛋白純化。1618多克隆抗體的制備及免疫原性的分析。16

簡介：研究背景目前我國正逐漸步入老齡化社會由于高血壓、糖尿病、高脂血癥等相關疾病發(fā)病率的上升加之現(xiàn)代人們不合理的飲食結構、不良的生活方式以及較大的精神壓力缺血性心血管疾病如冠狀動脈粥樣硬化性心臟、外周缺血性疾病的發(fā)病率逐年上升病死率、致殘率高不僅嚴重影響人們的生活質量而且給社會和家庭帶來沉重的經(jīng)濟負擔。如今常規(guī)藥物治療、外科和經(jīng)皮介入血管重建術的快速發(fā)展使得大部分患者能夠正常的生活工作。然而仍有一部分患者術后出現(xiàn)再狹窄、微血管功能障礙或由于彌漫性或嚴重的病變不適于常規(guī)血管成形術而藥物治療不能有效控制癥狀。因此必須再尋求其他新的治療策略。上世紀90年代以來人們發(fā)現(xiàn)組織器官缺血時機體內(nèi)促血管生成相關因子的表達反應性增加通過促進缺血組織的血管新生加速側枝循環(huán)的建立從而改善血流灌注但自身代償往往不充分、不及時而給予外源性生長因子即“治療性血管新生”為缺血性疾病治療提供了新的思路是當前國際上最熱點研究領域之一。最早用于治療性血管新生的有血管內(nèi)皮生長因子VULARENDOTHELIALGROWTHFACTVEGF和成纖維細胞生長因子FIBROBLASTGROWTHFACTFGF。VEGF和FGF通過了Ⅰ期臨床試驗但Ⅱ期臨床試驗的結果卻不盡如人意。VEGF不能誘導功能成熟的血管形成出現(xiàn)血管滲漏、組織水腫等不良反應；FGF治療可以促進血管新生但部分患者出現(xiàn)蛋白尿。目前有關VEGF和FGF的臨床研究已經(jīng)停止。人們逐漸意識到血管新生是一個復雜的生物學過程單純針對某階段或應用單一因子干預治療難以形成趨近生理狀態(tài)的成熟的新生血管。如何實現(xiàn)理想血管重建是血管新生領域的重大挑戰(zhàn)近年來研究顯示低氧誘導因子1HYPOXIAINDUCIBLEFACT1HIF1是一個非常重要的核轉錄因子由Α和Β兩個亞基組成Α為其功能活性亞基。HIF1Α與Β結合后從胞漿轉位到核內(nèi)直接或間接調(diào)控多種下游靶基因涉及到血管生長、血管張力、糖代謝、紅細胞生成等多種病理生理改變。到目前為止已發(fā)現(xiàn)參與血管新生的30多種基因受HIF1Α的調(diào)控因此HIF1Α是血管新生的上游核心調(diào)控因子。臨床前期研究表明HIF1Α治療誘導的新生血管具有無明顯炎癥反應、不滲漏、不引起組織水腫的特點從而形成生理功能完整的新生血管。因此HIF1Α是一個十分具有應用前景的血管新生治療因子。然而HIF1Α在常氧下的半衰期很短5MIN即可全部降解。這是由于HIF1Α含有氧依賴降解區(qū)OXYGENDEPENDENTDEGRADATIONDOMAINODDDODDD區(qū)PRO402以及PR0564兩個脯氨酸殘基是否羥基化決定其蛋白穩(wěn)定性。常氧情況下PRO402和或PRO564被脯氨酸羥化酶PPROLYLHYDROXYLASEDOMAINPHD羥化后經(jīng)泛素途徑降解。低氧時該過程受到抑制HIF1Α不被降解因而變得穩(wěn)定。氧濃度除了對HIF1Α蛋白穩(wěn)定性調(diào)節(jié)以外更為重要的是對HIF1Α轉錄活性調(diào)節(jié)。HIF1Α的C末端含有轉錄激活區(qū)CTRANSACTIVATIONDOMAINSCTKD常氧情況下CTAD803位點的天門冬酰胺ASN803被羥化可阻止HIF1Α與部分輔助激活因子如CBPP300的結合降低其轉錄活性。故即使蛋白穩(wěn)定的HIF轉位到核內(nèi)后因HIF1Α的CTADASN803羥化降低了激活下游靶基因的能力。低氧時該過程受到抑制不能有效的催化結構域內(nèi)ASN803羥基反應從而導致HIF1Α的高轉錄活性。在此基礎上本課題組將HIF1Α的ODDD區(qū)PRO402和PRO564以及CTAD區(qū)ASN803進行了點突變并選擇具有可轉染非增殖細胞并且轉染效率高、無致瘤性、容易獲得高滴度等優(yōu)點的腺病毒作為基因載體成功構建腺病毒介導的三突變型HIF1ΑADHIF1ΑTRIP使其在常氧不僅能穩(wěn)定表達而且具有高轉錄活性可以促進下游血管生成因子的表達有利于誘導成熟的血管新生。盡管我們已驗證了ADHIF1ΑTRIP高生物學活性并在動物實驗中取得了成功可望應用于臨床但是腺病毒在溶液中理化性質不穩(wěn)定、不耐熱通常需保存在含有冷凍保護劑的緩沖液中并于80℃儲存。由于運輸必須在干冰上進行、儲存冷鏈限制、使用前需要凍融等因素限制了其未來的臨床應用。冷凍干燥是將含水物料低溫冷凍使之凍結然后在低溫、高真空條件下使冰轉變?yōu)樗魵獬プ杂伤龠M行第二次干燥除去部分吸附于固體間隙中的結合水的干燥方法。其優(yōu)點和意義在于冰的升華帶走熱量使凍干整個過程保持低溫凍結狀態(tài)因此非常適用于熱敏具有生物活性藥品的干燥；真空狀態(tài)可以對藥品起到抗氧化的作用；而干燥后的物質含水量非常少、重量輕有利于在04℃甚至室溫條件下保存和運輸；使用方便加蒸餾水或生理鹽水制成溶液即可恢復到凍干前的狀態(tài)。在凍干過程以及儲存過程均存在影響藥品穩(wěn)定性的因素需要添加凍干保護劑而不同的物料由于其結構和組分的差異凍干保護劑也不盡相同選擇合適的凍干保護劑是制備出高質量凍干產(chǎn)品的關鍵。此外ADHIF1ΑTRIP用于基因治療需要通過實驗考察凍干后ADHIF1ΑTRIP的生物學活性。目的篩選合適的凍干保護劑制備凍干ADHIF1ΑTRIP觀察其在04℃條件下保存長期穩(wěn)定性并且考察凍干后ADHIF1ΑTRIP的生物學活性為ADHIF1ΑTRIP將來臨床應用提供劑型方面的實驗依據(jù)。方法1將重組腺病毒載體ADHIF1ΑTRIP、ADNULL以及ADLACZ在低代HEK293A細胞中進行病毒擴增；氯化銫濃度梯度離心透析純化；純化后提取病毒DNA進行PCR檢測同時行基因測序進行鑒定；終點稀釋法測定病毒滴度。2初選3組處方其組成WVA10％海藻糖、05％明膠、3％山梨醇B10％蔗糖、05％明膠、3％山梨醇；C5％海藻糖、5％蔗糖、05％明膠、3％山梨醇；按照上述保護劑分組的百分比要求加入到磷酸鹽緩沖液中分別與稀釋的ADHIF1ΑTRIP原液按11比例混合05ML西林瓶分裝以適當凍干曲線進行凍干。根據(jù)凍干后物理性狀、病毒滴度測定篩選凍干保護劑。進行加速熱穩(wěn)定性試驗并在凍干后1天以及第3、6、12個月測定病毒滴度觀察凍干ADHIF1ΑTRIP熱穩(wěn)定性和長期穩(wěn)定性。3ADLACZ以不同轉染復數(shù)MOI轉染微血管內(nèi)皮細胞HMVECS經(jīng)XGAL染色法測定重組腺病毒轉染效率。96孔板培養(yǎng)HMVECS凍干前ADHIF1ΑTRIP、凍干后ADHIF1ΑTRIP分別以最佳MOI轉染細胞在轉染后第24487296120小時用MTS方法檢測測細胞增殖的情況。4分別在ADHIF1ΑTRIP凍干后1天、凍干后6月、凍干后12月時間點提取病毒DNA進行PCR及PCR產(chǎn)物測序鑒定三突變型HIF1Α基因；并在上述3個時間點以ADHIF1ΑTRIP轉染HMVECS提取72小時蛋白進行WESTERNBLOT檢測HIF1Α蛋白的表達及下游VEGF蛋白的表達與液體ADHIF1ΑTRIP加以比較。5應用SPSS130統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析計量數(shù)據(jù)以X±S表示。凍干后不同保護劑組間ADHIF1ΑTRIP滴度比較采用單向方差分析方差齊時組間多重比較采用LSD法方差不齊時采用GAMESHOWELL檢驗；各組凍干前后滴度比較采用單樣本T檢驗。凍干后腺病毒加速熱穩(wěn)定性試驗、長期穩(wěn)定性試驗所測得滴度、MTS測得吸光度值組間比較及組內(nèi)不同時間比較采用重復測量的方差分析多重比較采用LSD法；加速熱穩(wěn)定性試驗同一時間點組間比較采用兩獨立樣本T檢驗長期穩(wěn)定性試驗、MTS測得吸光度值組間比較采用單向方差分析。P結果1在HEK293A細胞內(nèi)反復擴增后獲得重組腺病毒ADHIF1ΑTRIP、ADNULL和ADLACZ經(jīng)氯化銫純化后終點稀釋法測得的滴度分別為126LGPFUML、112LGPFUML、103LGPFUML。提取ADHIF1ΑTRIP病毒DNAPCR檢測HIF1Α基因得到預期的380BP、460BP、214BP的目的片段且DNA測序結果符合實驗要求。2以10％海藻糖、05％明膠、3％山梨醇保護劑制備的凍干腺病毒外觀呈白色餅塊狀殘余水分含量3ADLACZ以不同MOI轉染HMVECSXGAL染色結果顯示當MOI為100PFUCELL時重組腺病毒的感染效率趨于穩(wěn)定均在75％以上。MTS檢測顯示液體ADHIF1ΑTRIP和凍干ADHIF1ΑTRIP對HMVECS增殖無顯著差異P005但均與空白對照組之間有顯著差異P4經(jīng)PCR及基因測序鑒定凍干后1天、6月、12月的腺病毒所攜帶的目的基因信息無丟失或變異；WESTERNBLOT結果顯示凍干后1天、6月、12月的ADHIF1ΑTRIP與液體ADHIF1ΑTRIP轉染HMVECS后HIF1Α蛋白以及VEGF蛋白表達量與相當且均高于ADNULL組表達水平。結論1本課題組構建的重組腺病毒載體ADHIF1ΑTRIP、ADNULL和ADLACZ擴增后能獲得較高的滴度且轉染效率高為下一步實驗提供了保證。2以合適的保護劑制備凍干ADHIF1ΑTRIP能達到較滿意的凍干效果。凍干后ADHIF1ΑTRIP在04℃條件下能夠長期穩(wěn)定保存。3凍干后ADHEF1ΑTRIP仍具有良好的促進HMVECS增殖。4凍干能夠長期保持ADHIF1ΑTRIP的高生物活性。

簡介：目錄?IVABSTRACT?V弓丨言???第一部分文獻綜述?2第1章白細胞介素8IL8的研究進展?311ILB的生理生化特征?312IL8的基因結構、表達和調(diào)控?413IL8的受體?414IL8的生物學活性?4141?IL8對中性粒細胞的作用?4142?IL8對淋巴細胞的作用?4143?IL8對堿性粒細胞的作用?4144?IL8在血管發(fā)生中作用?415IL8在腫瘤發(fā)生中的作用?5151?IL8在腫瘤浸潤轉移中的作用及機制?‘?5152?IL8在腫瘤血管生成中的作用?5153?IL8與其它因子在腫瘤進展中的相互作用?616展望和結論?6第2章R干擾素誘導的溶酶體巰基還原酶（GILT的研究進展?721?GILT的活性特征?722?GILT的表達分布?723GIUT與相關疾病?724國內(nèi)外研究概況、水平和發(fā)展趨勢?7第3章研究物種介簡?931非洲爪蟾簡介???9311非洲爪蟾的分類及形態(tài)特征?9312非洲爪蟾的生活習性及分布?9313非洲爪蟾的研究用途?932非洲爪蟾的研究進展?9321在疾病動物模型中的研究及應用?10322在藥物篩選方面的研究及應用?10I53實驗結果與分析?35531非洲爪蟾GILT基因的克隆與鑒定?36532氨基酸序列的同源比對及系統(tǒng)發(fā)生分析?37533?XLGILTMRNA組織分布研究?38534?XLSGILT蛋白的表達與純化?39535?XLSGILT蛋白的巰基還原酶活性?4054艦?49參考文獻?42附錄碩士在讀期間研究成果?48EILT?49IN

簡介：密級密級博士學位論文NUPR1NUPR1在膠質母細胞瘤中的表達、生物學功在膠質母細胞瘤中的表達、生物學功能及分子機制研究能及分子機制研究作者姓名作者姓名李俊李俊指導教師指導教師徐英輝徐英輝學科專業(yè)學科專業(yè)外科學外科學大連醫(yī)科大學大連醫(yī)科大學碩（博）士學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文是本人在指導教師指導下進行的研究工作及所取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得大連醫(yī)科大學或其它教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名簽字日期年月日

簡介：背景地球表面70％以上的面積為海洋覆蓋除赤道附近海域以外各海域的水溫都低于人體溫度。海難或落水特別是在戰(zhàn)爭情況下由于戰(zhàn)斗人員落入海水或在寒冷地區(qū)作戰(zhàn)極易引起體溫過低癥。體溫過低癥是指各種原因引起的中心溫度低于35℃時的狀態(tài)。中、重度體溫過低癥的病死率極高因此體溫過低癥的救治是急救醫(yī)學和軍事醫(yī)學中的一項極其重要的課題。目的建立海水浸泡致體溫過低癥動物模型利用基于復合碳纖維材料產(chǎn)生遠紅外線電熱裝置對海水浸泡性中度體溫過低癥兔進行復溫同時與自然復溫和熱水浴復溫方法進行對照實驗觀測三種不同復溫方法的復溫作用及主要生物學效應探討治療海水浸泡性體溫過低癥的新型體外復溫技術。方法⑴建立動物模型選擇30只健康新西蘭兔作為實驗對象將動物置于210±05℃人工模擬海水環(huán)境浸泡至肛溫30℃建立體溫過低癥動物模型。⑵分組及復溫隨機分為3組每組10只分別為自然復溫組、熱水浴復溫組和遠紅外線復溫組。自然復溫組和熱水浴復溫組復溫方法參照海戰(zhàn)傷救治方法國家軍隊標準實施三組實驗兔均復溫至肛溫35℃。自然復溫組低溫暴露后的家兔用毛巾輕輕拭干然后置于室溫環(huán)境中進行復溫；熱水浴復溫組低溫暴露后的家兔浸入溫度為42℃的熱水中進行復溫；遠紅外線復溫組低溫暴露后的家兔置于遠紅外線復溫裝置中進行復溫起始溫度為35℃5分鐘內(nèi)逐漸升溫至42℃恒定復溫。⑶標本采集與指標檢測記錄各組所用復溫時間以及復溫后體溫下降度數(shù)對比復溫效果。分別于實驗兔浸泡前、浸泡后及復溫3小時后采集靜脈血標本檢測血漿乳酸和紅細胞膜ATP酶活性以觀察機體能量代謝情況檢測血漿MDA和SOD以觀察機體脂質過氧化反應情況所有結果進行統(tǒng)計學處理和分析。結果①中度體溫過低癥動物模型的建立室溫25℃時基礎體溫394±03℃的家兔經(jīng)溫度為210±05℃人工海水浸泡后家兔肛溫以031±004℃MIN的速度下降約3533±356MIN降至300℃達到中度體溫過低癥的標準。②復溫效果指標各組平均復溫時間自然復溫組22500±872MIN、熱水浴復溫組6775±311MIN、遠紅外線復溫組7863±469MIN熱水浴復溫組復溫稍快于遠紅外線復溫組P結論⑴與自然復溫法和熱水浴復溫方法比較遠紅外線電熱復溫法具有復溫速度快、體溫后降幅度小等優(yōu)點。⑵在改善機體細胞能量代謝和降低脂質過氧化反應的作用上遠紅外線電熱復溫法較另兩種復溫方法顯示出更顯著的生物學效應?；趶秃咸祭w維材料產(chǎn)生遠紅外線電熱復溫法是一種有效救治海水浸泡性體溫過低癥的方法。

簡介：所在學院所在學院第一臨床醫(yī)學院第一臨床醫(yī)學院2017年3月THEVALUEOFMULTIMODALITYIMAGINGINBREASTCANCERANDITSRELATEDBIOLOGICALINDICATORSＡDISSERTATIONSUBMITTEDTOXINJIANGMEDICALUNIVERSITYINPARTIALFULLFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEDEGREEOFDOCTOROFMEDICINEBYJUANYAODIAGNOSTICIMAGINGDISSERTATIONSUPERVISORPROFWENYALIUMARCH,2017