微管蛋白抑制劑ZP-20f對口腔鱗狀細胞癌周期及凋亡的作用機制.pdf

1、目的：
　　本實驗采用MTT實驗，Western Blot實驗，平板克隆實驗及流式細胞實驗檢測微管蛋白抑制劑ZP-20f對體外培養(yǎng)的口腔鱗癌細胞的增殖、凋亡及細胞周期的影響，并進行相關數(shù)據(jù)分析。探討微管蛋白抑制劑Zp-20f在口腔鱗狀細胞癌中的作用機制。
　　方法：
　　1、口腔鱗癌SCC-9、CAL-27細胞的細胞培養(yǎng)。
　　2、MTT法檢測Zp-20f對口腔鱗癌細胞SCC-9、CAL-27細胞的毒性作用，并計

2、算最實試驗濃度IC50。
　　3、流式細胞術檢測口腔鱗癌細胞SCC-9、CAL-27細胞的周期及凋亡率。
　　4、應用平板克隆形成實驗分析Zp-20f對口腔鱗狀細胞癌細胞SCC-9、CAL-27的毒性效應。
　　5、Wetern Blot檢測SCC-9、CAL-27細胞中相關蛋白的表達變化。
　　結果：
　　1、ZP-20f可顯著抑制口腔鱗癌細胞增殖 ZP-20f在一定濃度范圍內(nèi)能顯著抑制口腔鱗癌的增殖作用

3、，且其抑制活性具有濃度依賴作用。平板克隆實驗可以看出ZP-20f能濃度依賴的抑制腫瘤細胞克隆的形成。
　　2、ZP-20f可在G2/M期阻滯細胞周期 ZP-20f在一定濃度范圍內(nèi)能顯著誘導口腔鱗癌細胞G2/M期阻滯，并具隨著化合物濃度的增加，G2/M期細胞比例隨之增加。
　　3、ZP-20f可在G2/M期阻滯細胞周期 ZP-20f在一定濃度范圍內(nèi)能顯著誘導口腔鱗癌細胞G2/M期阻滯，并具隨著化合物濃度的增加，G2/M期細胞比

4、例隨之增加。
　　4、細胞周期相關蛋白量發(fā)生變化化合物在一定濃度范圍內(nèi)能引起細胞內(nèi)周期和凋亡相關蛋白含量的變化，使細胞中周期與凋亡相關蛋白Cycling B1、p-H3和cleaved-PARP的量顯著增加，且具有濃度依賴性（圖5）。
　　結論：
　　1、 ZP-20f對口腔鱗癌細胞SCC-9和Cal-27的體外增殖抑制活性較強，能明顯將細胞周期阻滯在G2/M期，并能誘導細胞凋亡；
　　2、ZP-20f在體外有較