局部注射胸腺素β4凝膠預防食管環(huán)周內(nèi)鏡黏膜下剝離術(shù)后狹窄的有效性及其初步機制.pdf

1、內(nèi)鏡黏膜下剝離術(shù)(Endoscopic submucosal dissection，ESD)是在內(nèi)鏡下黏膜切除術(shù)(Endoscopic Mucosal Resection，EMR)的基礎上發(fā)展而來的一項新技術(shù)，主要用于治療消化道良性腫瘤、早癌和癌前病變。與EMR相比，ESD主要的優(yōu)點在于:即使較大病變(＞2 cm) ESD也可進行整塊切除，其形狀和大小都是可控的，并可進行病理組織學檢查，評價切緣有無癌細胞殘留;即使是潰瘍性病變也可切除。

2、隨著ESD技術(shù)的進步，較大的食管病變即使是環(huán)周性食管病變也可以通過ESD技術(shù)完全切除。但是大范圍病變切除也帶來了一些相關(guān)并發(fā)癥，尤其是容易導致食管狹窄。我們將一個標準內(nèi)鏡(直徑為9.8mm)難以通過狹窄處定義為食管狹窄。食管狹窄會引起吞咽困難，降低生活質(zhì)量等。
　　ESD術(shù)后導致食管狹窄可能的機制主要包括以下幾方面:黏膜的延遲愈合，黏膜下層大量細胞外基質(zhì)的炎癥和纖維化以及固有肌層的萎縮。目前臨床上比較常用的治療食管術(shù)后狹窄的方法主

3、要是球囊擴張術(shù)和覆膜支架植入術(shù)，然而反復的內(nèi)鏡診療也給患者帶來的相應的風險和麻煩。因此，根據(jù)導致食管狹窄的機制，目前有更多種預防策略被探索，包括糖皮質(zhì)激素的全身及局部使用、再生醫(yī)學途徑和局部使用抗炎抗纖維化藥物等，取得了一定的療效，但總的來說由于安全性或成本等問題，不適合廣泛的臨床應用。
　　胸腺素β4(Thymosinβ4，Tβ4)由43個氨基酸組成，是化學結(jié)構(gòu)高度保守的水溶性小分子酸性肽。Tβ4具有多種生物學功能，包括促進血管

4、生成、加速上皮細胞遷移、調(diào)節(jié)炎癥反應、抗纖維化和抑制瘢痕形成等，多項動物實驗及臨床試驗揭示其能促進皮膚、角膜和心臟等創(chuàng)傷的愈合。因此，我們推測將Tβ4局部應用到食管ESD術(shù)后創(chuàng)面，也可以促進上皮細胞的遷移，抑制創(chuàng)面的炎癥和纖維化，從而促進創(chuàng)面愈合，延緩食管狹窄進程。
　　本研究將通過動物實驗評估Tβ4在預防食管環(huán)周ESD術(shù)后狹窄的有效性及安全性，并進行初步機制的探索。本實驗分為兩部分:
　　第一部分 局部注射Tβ4凝膠預防食

5、管環(huán)周ESD術(shù)后狹窄的有效性研究。
　　目的:評估局部注射Tβ4凝膠在預防食管環(huán)周ESD術(shù)后狹窄中對食管環(huán)周ESD術(shù)后創(chuàng)面愈合時間和恢復狹窄所需內(nèi)鏡下球囊擴張次數(shù)的影響。
　　方法:8只巴馬豬均在麻醉后進行食管環(huán)周ESD手術(shù)。用藥組4只豬在ESD術(shù)后立即和第3天在創(chuàng)面及交界處黏膜下注射Tβ4凝膠，在第7天和之后每隔1周行內(nèi)鏡下觀察，食管出現(xiàn)狹窄后進行內(nèi)鏡下球囊擴張，另4只對照組的在狹窄后僅行球囊擴張，擴張方法同用藥組，直至創(chuàng)

6、面完全愈合。
　　結(jié)果:用藥組和對照組都出現(xiàn)了食管狹窄，但用藥組與對照組相比，縮短了狹窄愈合時間（15.25±3.5周vs.23.75±3.304周，P=0.012），減少了擴張次數(shù)（8.5±2.082 vs.17.25±2.754，P=0.002），且最狹窄程度更輕(P=0.046)。2組均未出現(xiàn)嚴重并發(fā)癥。
　　結(jié)論:局部注射Tβ4凝膠可緩解豬食管環(huán)周ESD術(shù)后的狹窄進程，為預防食管環(huán)周ESD術(shù)后狹窄提供了新的策略。

7、r>　　第二部分 局部注射Tβ4凝膠預防食管環(huán)周ESD術(shù)后狹窄的初步機制研究。
　　目的:從組織學角度和炎癥細胞因子水平進一步驗證Tβ4預防食管環(huán)周ESD術(shù)后狹窄的有效性。
　　方法:18只巴馬豬均建立食管環(huán)周ESD模型。用藥組(n=8)在環(huán)周ESD術(shù)后立即和第3天在創(chuàng)面及交界處黏膜下注射胸腺素β4凝膠，對照組(n=10)僅行環(huán)周ESD。所有動物均進行臨床和內(nèi)鏡觀察，2周后處死，取出食管，行組織學分析。定量檢測術(shù)前和第7天時

8、血清中部分炎癥細胞因子的表達水平。
　　結(jié)果:術(shù)后2周時用藥組與對照組相比較，食管直徑更寬（3.13±1.126vs.1.88±0.835，P=0.024），食管纖維層厚度更薄(1.16±0.27mmvs.1.55±0.31mm，P=0.018)，新生上皮層長度更長（3.77±2.25mm vs.1.59±1.45mm，P=0.028）。第7天時IL-4、IL-6、IL-8、IL-12 p70、INF-γ和TNF-α這6項炎癥細胞

9、因子在2組動物有明顯差異，P值分別為＜0.001、0.001、0.03、0.014、0.019和0.007，且IL-4、IL-12 p70和TNF-α這3項炎癥細胞因子第7天和第0天的差值(D7-D0)在2組動物中仍有顯著差異(P＜0.001，P=0.001，P=0.006)。
　　結(jié)論:豬食管ESD術(shù)后注射Tβ4凝膠可降低創(chuàng)面炎癥、減輕管壁纖維化，促進創(chuàng)面新生上皮細胞的增殖和遷移，緩解食管狹窄進程。
　　依據(jù)上述研究結(jié)果本