Ⅰ-Ⅳ型登革病毒非結構蛋白NS1通用型單克隆抗體的制備及NS1抗原檢測ELISA方法的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、登革病毒(dengue virus,DV或DENV)可以感染人類并導致嚴重的臨床疾病[3],引起的登革出血熱和登革休克綜合征病死率高。因些對登革病毒感染患者的早期診斷有很重要的意義。登革病毒非結構蛋白NS1具有較強的免疫原性,早期即可出現在感染了登革病毒的患者血清中,且出現時間早于IgM抗體,有研究表明其可以用于登革熱的早期診斷以及病情監(jiān)測。因此,NS1有望成為早期診斷登革病毒感染的方法。
  本課題研究利用生物信息軟件分析四種血

2、清型登革病毒NS1的抗原表位,選擇四種血清型NS1蛋白中共同保守的抗原表位通過與小分子載體BSA偶聯,通過免疫小鼠以及雜交瘤技術制備獲得四個型別NS1通用型單克隆抗體23株。同時根據Ⅰ-Ⅳ型登革病毒NS1蛋白基因序列設計特異性NS1引物,經RT-PCR得到四種型別的NS1全基因,并分別克隆到pMD19T載體上,隨后,經BamHⅠ和NotⅠ雙酶切將目的片段進一步克隆到表達載體pET30a上,構建Ⅰ-Ⅳ型登革病毒NS1蛋白BL-21高效表達

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