前列腺癌Du145細胞系腫瘤干細胞的分離、鑒定及其生物學(xué)特性和相關(guān)機制研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文前列腺癌Du145細胞系腫瘤干細胞的分離、鑒定及其生物學(xué)特性和相關(guān)機制研究姓名：陳偉申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：泌尿外科指導(dǎo)教師：王國民20070412復(fù)旦大學(xué)博士論文中文摘要人雄激素非依賴性前列腺癌Dul45細胞系腫瘤干細胞的分離、鑒定及其生物學(xué)特性和相關(guān)機制研究摘要第一部分人激素非依賴性前列腺癌Dul45細胞系腫瘤干細胞的分離與鑒定【目的l于Dul45細胞內(nèi)分選表達不同表面分子的細胞群，篩選出優(yōu)勢細胞，確定具有干細胞

2、特性的細胞群，完成腫瘤干細胞的鑒定和腫瘤干細胞表面標(biāo)記的確定。【方法l應(yīng)用人雄激素非依賴性前列腺癌細胞系Dul45體外培養(yǎng)，免疫細胞化學(xué)、流式細胞術(shù)檢測Dul45細胞表面分子和分化標(biāo)志的表達譜；免疫磁珠分選法結(jié)合I型膠原黏附法分選CDll7細胞、CD34細胞和CD44整合素21CDl33細胞；應(yīng)用克隆形成實驗、免疫細胞化學(xué)、流式細胞術(shù)、CellTiterBlue細胞增殖活性檢測法對上述的各群細胞進行鑒定，篩選出具有自我更新、多向分化和增

3、殖能力的細胞群。I結(jié)果】Dul45細胞表面表達CD24、CD34、CD44、CD59、CDll7、CDl33、CKl4、CKl8；免疫磁珠(MACS)分選法可獲得高純度CDll7細胞、CD34細胞、CD44整合素21CDl33細胞；Dul45細胞中CD44整合素21CDl33細胞克隆形成率(CFE)顯著高于其它類型細胞(P005)，傳代后，克隆形成率無顯著變化。CDll7細胞、CD34細胞克隆形成能力較弱，傳代后CFE明顯下降。CD44

4、整合素21CDl33細胞形成的克隆與其它類型細胞形成的克隆存在明顯的形態(tài)學(xué)差異。CD44整合索21CDl33細胞具有自我更新能力和多向分化潛能，CDll7細胞、CD34細胞未表現(xiàn)這種潛能；與整合素2tCDl33。和未分選的Dul45細胞相比較，CD44整合素21CDl33細胞增殖能力更強(P005)【結(jié)論lCD44“整合素21CDl33細胞具有克隆形成、自我更新、多向分化和強增殖潛能，即千細胞特性。CD44、整合素21、CD133可作為