奶牛低酸度酒精陽性乳與乳腺上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)關(guān)系的研究.pdf

1、為了進(jìn)一步研究酒精陽性乳的發(fā)病機(jī)理，本研究從乳腺上皮細(xì)胞自由基代謝、膜組分改變和形態(tài)學(xué)變化的角度對酒精陽性乳的發(fā)病機(jī)理進(jìn)行了探討。檢測了酒精陽性乳患牛乳腺上皮細(xì)胞自由基含量及相應(yīng)抗氧化指標(biāo)的變化。同時提取乳腺上皮細(xì)胞膜，檢測了乳腺上皮細(xì)胞膜磷脂組分的相對百分含量，并對膜蛋白進(jìn)行了SDS-PAGE電泳，蛋白質(zhì)凝膠成像系統(tǒng)對電泳條帶進(jìn)行定性定量分析，對膜蛋白中具有重要功能的ATP酶的活性進(jìn)行了測定。并取乳腺組織進(jìn)行了常規(guī)病理切片和超微切片的

2、觀察。在調(diào)查酒精陽性乳發(fā)病原因和本實驗室已有試驗的基礎(chǔ)上，自配復(fù)合藥物“酸乳凈”。把試驗牛分為3組，一組作為陰性對照，另一組按照1包每頭每天，連續(xù)5天投藥作為治療組，預(yù)防試驗組在治療組的基礎(chǔ)上繼續(xù)按1/4劑量投藥，連續(xù)10天，檢測其對產(chǎn)奶量和對酒精陽性乳的治療作用。試驗結(jié)果表明： 1．已有的許多研究雖然表明酒精陽性乳是一種全身疾病的局部反應(yīng)，但多數(shù)的研究只檢測了其血液學(xué)指標(biāo)的變化。本試驗對比了陽性牛和陰性牛乳腺組織自由基及抗氧化

3、指標(biāo)的變化，表明陽性?；钚匝?ROS)含量、丙二醛(MDA)含量顯著升高，而超氧化物歧化酶(SOD)的活性顯著降低，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和總抗氧化能力(TAOC)略微降低，但與正常牛的差異不顯著。乳腺組織自由基的增加是引起酒精陽性乳的啟動因子，而抗氧化能力下降是引起發(fā)病的因素之一。 2．乳腺上皮細(xì)胞膜SDS-PAGE電泳分離出5條主條帶，與對照組相比，陽性牛蛋白I帶的相對百分含量顯著升高，而蛋白Ⅱ和蛋白Ⅳ的相對百分

4、含量顯著降低，膜蛋白發(fā)生交聯(lián)形成高聚物(HMP)，乳腺上皮細(xì)胞膜磷脂酰絲氨酸(PS)、磷脂酰乙醇胺(PE)的相對百分含量明顯下降。這是由于過多的自由基攻擊生物膜系統(tǒng)，使乳腺組織細(xì)胞膜中膜蛋白組分、磷脂組分發(fā)生改變。 3．自由基攻擊膜蛋白使膜上具有重要生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)功能下降，特別是與能量和離子代謝有重要關(guān)系的ATP酶活性降低，同時磷脂組分的改變也使依賴膜脂而存在活性的ATP酶活性改變。 4．細(xì)胞膜膜組分的改變造成細(xì)胞形

5、態(tài)和功能的變化，表現(xiàn)為細(xì)胞發(fā)生腫脹、水泡變性，線粒體腫脹、嵴減少，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡化，膜缺損、膜上微絨毛減少。說明酒精陽性乳由于乳腺上皮細(xì)胞膜膜組分及形態(tài)學(xué)的改變使細(xì)胞膜流動性和可變形性下降、通透性升高，乳汁分泌功能異常而分泌異常乳。 5．與對照組相比，治療組和預(yù)防試驗組在投藥后5天時，產(chǎn)奶量和抗氧化性能有較大提高，但15天時治療組發(fā)生反彈，預(yù)防試驗組性能繼續(xù)提高，25天后治療組和預(yù)防試驗組都發(fā)生反彈，但預(yù)防試驗組的性能較治療前高，說