低酸度酒精陽性乳與乳蛋白、血清蛋白及乳脂變化關(guān)系的研究.pdf

1、本試驗(yàn)為了進(jìn)一步探討酒精陽性乳患牛乳汁不穩(wěn)定性的成因及酒精陽性乳的產(chǎn)生機(jī)制，作者通過SDS-PAGE電泳對酒精陽性乳患牛脫脂乳中主要乳蛋白組分進(jìn)行了分離，并通過凝膠成像系統(tǒng)分析了各乳蛋白組分的相對百分含量：同時(shí)對酒精陽性乳患牛乳汁中17種氨基酸進(jìn)行了檢測，從蛋白質(zhì)代謝的角度綜合分析了酒精陽性乳患牛乳汁中乳蛋白主要組分變化、氨基酸含量的變化與酒精陽性乳不穩(wěn)定性之間的關(guān)系。采用醋酸纖維素膜電泳對酒精陽性乳患牛血清中主要血清蛋白組分進(jìn)行了分離

2、，同時(shí)也分析了各血清蛋白組分相對百分含量的變化：同時(shí)為了研究乳脂肪酸組分變化與酒精陽性乳的發(fā)生之間的關(guān)系，作者采用氣.質(zhì)聯(lián)用儀對酒精陽性乳患牛乳汁中脂肪酸組分進(jìn)行了檢測，分析了各脂肪酸組分相對百分含量的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： 1.脫脂乳經(jīng)SDS-PAGE電泳分離、考馬斯亮藍(lán)染色、凝膠成像系統(tǒng)分析，主要乳蛋白組分從負(fù)極至正極依次可顯示：血清白蛋白(SA)、免疫球蛋白重鏈(1gG-H)、α-酪蛋白(α-CN)、β-酪蛋白(β-CN)、

3、κ-酪蛋白(κ-CN)、β-乳球蛋白(β-LG)、α-乳球蛋白(α-LG)等(圖1-1)。經(jīng)凝膠成像系統(tǒng)分析各乳蛋白組分的相對百分含量(％)，與正常牛乳相比，酒精陽性乳總?cè)榈鞍鬃兓伙@著(P>0.05)；總酪蛋白(tCN)含量顯著低于正常乳(P<0.05)；酪蛋白中的α-CN無顯著變化(P>0.05)，而β-CN顯著增高(P<0.05)，κ-CN顯著下降(P<0.01)。酒精陽性乳患牛乳汁中主要蛋白組分發(fā)生了變化，乳汁中酪蛋白微球的穩(wěn)定

4、性遭到了嚴(yán)重破壞，乳汁膠體的穩(wěn)定性降低，導(dǎo)致酒精試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)。 2.17種氨基酸分析顯示，與正常乳相比，酒精陽性乳乳汁中大多數(shù)氨基酸含量沒有顯著變化(P>0.05)，胱氨酸(Cys)含量極顯著降低(P<0.01)，而精氨酸(Arg)極顯著升高(P<0.01)；亮氨酸(Leu)含量顯著升高(P<0.05)。Cys在蛋白質(zhì)中形成二硫鍵對蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性起重要作用；Leu帶有異丁基，具有較強(qiáng)的疏水性；Arg含有一個(gè)帶正電荷的胍基，Ar

5、g含量增多使微球間的靜電斥力減弱，同時(shí)對周圍離子的吸引力減弱，外周水化層變薄，乳汁的整體穩(wěn)定性降低。 3.血清經(jīng)醋酸纖維素薄膜電泳分離后，電泳譜帶有4條，按遷移率大小依次為清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白(圖3-1)。酒精陽性乳患牛血清總蛋白含量、清蛋白/球蛋白(A，G)值都沒有顯著變化(P>0.05)。血清蛋白組分中，清蛋白、α-球蛋白沒有顯著的變化(P>0.05)；但β-球蛋白相對百分含量極顯著升高(P<0.01)

6、，γ-球蛋白顯著升高(P<0.05)。酒精陽性乳患牛體內(nèi)血清蛋白組分的這種變化可能是酒精陽性乳患牛體內(nèi)氧化損傷及甲狀腺機(jī)能降低所致。 4.脂肪酸分析表明，實(shí)驗(yàn)中共測定出牛乳中脂肪酸7種，其中飽和脂肪酸(SFA)4種：肉豆蔻酸、十五烷酸、棕櫚酸、硬脂酸；不飽和脂肪酸3種：棕櫚油酸、亞油酸、油酸(圖4-1)。酒精陽性乳中總?cè)橹逝c正常乳相比沒有顯著變化(P>0.05)；乳中總飽和脂肪酸沒有發(fā)生顯著變化，但飽和脂肪酸中十五烷酸與正常牛

7、相比呈極顯著升高(P<0.01)；酒精陽性乳患牛乳汁中不飽和脂肪酸(UFA)顯著上升(P<0.05)，同時(shí)不飽和脂肪酸中共軛亞油酸(CLA)極顯著上升(P<0.01)。亞油酸在動物體內(nèi)轉(zhuǎn)化為CLA的過程中發(fā)生自由基氧化反應(yīng)，有大量的自由基產(chǎn)生，共軛亞油酸(CLA)含量升高說明酒精陽性乳患牛機(jī)體內(nèi)亞油酸自由基氧化反應(yīng)強(qiáng)烈，同時(shí)機(jī)體內(nèi)抗氧化酶活性下降，從而使機(jī)體清除自由基的能力下降，最終造成大量的自由基存在，對乳腺組織造成微損傷，使乳腺組織