大鼠心肌梗死后A1受體和NADPH氧化酶系統(tǒng)表達(dá)的改變及纈沙坦的干預(yù)作用研究.pdf

1、目的：
　　 探討大鼠心肌梗死后血管緊張素Ⅱ1型受體（AT1受體）和NADPH氧化酶系統(tǒng)表達(dá)的改變及纈沙坦的干預(yù)作用。
　　 方法：
　　 選取體重230～260g健康雄性SD(Sprague Dawley)大鼠，稱體重后用3％戊巴比妥(2ml/kg)腹腔注射麻醉并行氣管插管，開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立心肌梗死(MI)模型，假手術(shù)組(Sham組)僅將縫線穿過前降支而不結(jié)扎。將MI大鼠隨機(jī)分為2個亞組，一組于術(shù)后

2、第2天接受纈沙坦（10mg/kg/d）灌胃給藥5周，設(shè)為心梗藥物干預(yù)組（MI干預(yù)組），另一組給予等體積生理鹽水灌胃，設(shè)為心肌梗死組(MI組)。第6周時存活大鼠共25只，其中Sham組10只，MI組6只，MI干預(yù)組9只。將大鼠稱體重后用3%戊巴比妥(2ml/kg)腹腔麻醉，迅速開胸取出心臟，分離出左心室并稱重后取左心室非梗死區(qū)心肌組織置于液氮凍藏備用。采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR法)檢測AT1受體mRNA和NADPH氧化酶

3、亞單位gp91Phox mRNA的表達(dá)，Western-Blot法檢測NADPH氧化酶亞單位gp91phox蛋白表達(dá)水平，WST-1法測定心肌組織超氧陰離子(O2-)濃度及NADPH氧化酶活性。
　　 結(jié)果：
　　 1．MI組大鼠AT1受體mRNA及gp91Phox mRNA的表達(dá)水平分別是Sham組的(3.70±1.45)倍和（4.57±1.84）倍，兩組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，是MI干預(yù)組的（3.08±1.

4、34）倍和（2.87±1.75）倍，兩組比較亦有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)，而MI干預(yù)組AT1受體mRNA表達(dá)水平是Sham組的(1.20±1.06)倍，兩組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，gp91Phox mRNA表達(dá)水平是Sham組的(1.59±1.08)倍，兩組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2．MI組和Sham組大鼠gp91phox蛋白與內(nèi)參GAPHD灰度比分別為(0.98±0.26)和(0.37±0.09)

5、，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，MI干預(yù)組gp91phox蛋白與內(nèi)參GAPHD灰度比為(0.58±0.13)，與MI組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，與Sham組比較亦有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　 3．MI組大鼠非梗死區(qū)心肌組織O2-濃度及NADPH氧化酶活性分別為（21264.83±1354.36）RLU/mg和（4.65±0.54）RLU/mg，均較Sham組[分別為（7812.75±1078.71

6、）RLU/mg和（2.69±0.18）RLU/mg]顯著升高(P＜0.01)，MI干預(yù)組O2-濃度為(9027.93±1236.47)RLU/mg，NADPH氧化酶活性為(2.91±0.23)RLU/mg，與MI組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，與Sham組比較亦有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　 4.gp91phox mRNA與AT1受體mRNA表達(dá)水平顯著相關(guān)(R=0.708，P＜0.01)；O2-、濃度與NADPH

7、氧化酶亞單位gp91phox mRNA表達(dá)水平及NADPH氧化酶活性亦顯著相關(guān)(分別為R=0.704，P＜0.01和R=0.831，P＜0.01)。
　　 5．MI組大鼠左室質(zhì)量指數(shù)為（7.46±0.54）mg/g，Sham組為（5.04±0.71）mg/g，兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P±0.01)，MI干預(yù)組為（5.74±0.66)mg/g，較MI組顯著降低(P＜0.01)，與Sham組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　

8、　 結(jié)論：
　　 1．大鼠MI后非梗死區(qū)心肌組織AT1受體mRNA、gp91Phox mRNA及蛋白表達(dá)、NADPH氧化酶活性和O2-度、左室質(zhì)量指數(shù)較Sham組均顯著升高，表明MI后NADPH氧化酶系統(tǒng)及RAS系統(tǒng)被激活，左室發(fā)生重構(gòu)。
　　 2．MI大鼠用纈沙坦干預(yù)后，非梗死區(qū)心肌組織中AT1受體mRNA、gp91PhoxmRNA及蛋白表達(dá)、NADPH氧化酶活性和O2-濃度、左室質(zhì)量指數(shù)較MI組均顯著下降，提示阻斷