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文檔簡介
1、浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文Hsp27與PIMT在乳腺癌細(xì)胞中的相互作用研究姓名：吳業(yè)卿申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：趙輔昆張世馥20100320浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文Hsp27interactswithProtein—L—isoaspartylMethyltransferase(PIMT)inbreastcancercellsAbstractBreastcancerisoneofthemostcommoncanc
2、erofwomenItsrecurrenceandmetastasisistheleadingcauseofdeathinbreastcancerpatientsAsasmallmolecularchaperone，Hsp27playsanimportantroleininvasion、metastasisandresistanceofbreastcancerbuttheregulatorymechanismisunclearTostu
3、dythemolecularmechanismofHsp27inbreastcancercells，Ourlaboratoryhaveidentified17Hsp27associatedproteinsinMCF7LcellsusingHsp27immunoprecipitationassaycoupled、^，ithTwoDimensionalGelElectrophoresisandMassSpectrometryanalysis
4、，OneofthemisProteinL—isoaspartylMethyltransferase(PIMT)PIMTisaproteinrepairenzyme，alsoinvolvedincellstressresponseaswiththeHsp27StudieshaveshownthatHsp27andPIMTarebothinvolvedinregulationofP13K／AktandMAPKsignalingpathway
5、andtheregulationofepilepsyThesesuggesttheymayplayallimportantfunctioninthemechanismofthediseaseHence，furtherstudyoftherelationshipbetweenPIMTandHsp27issignificanttoclarifythemolecularmechanismofbreastcancerandsearchforne
6、wDiagnosticmarkersandtherapeutictargetsnlisstudyaimstoV嘶母theinteractionofHsp27誠tllPIMTandexploretheirregulatorymechanisminbreastcancerceilsTherecombinantexpressionvectorpGEX4T1一Hsp27witlltheGSTtagwasconstructedinthemetho
7、dofgenerecombinationnlerecombinantexpressionvectorGSTHsp27and6xHisPIMTwereexpressed、purifiedandthenidentifiedbySDSPAGEandMassSpectrum(MS)111einvitrointeractionbetweenGSTHsp27and6xHisPIMTWaSexaminedbymeansofGSTpull—downas
8、sayaswellasWesternBlotInordertoexaminetheircolocalizationinthecelllineofMCF一7LthroughthetechniqueofConfocalLaSerScanningMicroscopenlespecificprimaryantibodyandsecondantibodywitllafluorensencelabelAlexaFluor546／488wereuse
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