天蠶素抗菌肽在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用

1、天蠶素抗菌肽在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用,黃滄海 博士集美大學(xué),內(nèi) 容,抗菌肽抗菌肽在水產(chǎn)上的研究與應(yīng)用天蠶素抗菌肽－水產(chǎn)飼料添加劑天蠶素抗菌肽－水產(chǎn)藥物,抗菌肽,天蠶素、蜜蜂肽、馬蓋寧、鱟素等在誘導(dǎo)條件下，動物免疫防御系統(tǒng)產(chǎn)生的一類對抗外源性病原體致病作用的防御性肽類活性物質(zhì)分子量小，穩(wěn)定性好，水溶性好，抗菌機(jī)理獨(dú)特，對高等動物正常細(xì)胞無害雙親結(jié)構(gòu)，陽離子型具有較強(qiáng)的廣譜抗菌能力，對革蘭氏陽性菌及陰性菌均有殺傷作用，對真菌、

2、寄生蟲、病毒、腫瘤細(xì)胞也有一定的抑殺作用,抗菌肽與肽類抗生素…,第一代糖肽類抗生素：萬古霉素、替考拉寧、去甲萬古霉素第二代糖肽類抗生素：Dalbavancin、Oritavancin、Telavancin環(huán)脂肽類抗生素：多粘菌素、桿菌肽、達(dá)托霉素抗菌肽種類多、來源多、抗菌譜廣,抗菌肽與肽類抗生素…,抗生素主要是細(xì)菌、真菌或放線菌發(fā)酵的產(chǎn)物，由酶促反應(yīng)合成；抗菌肽是生物基因編碼在核糖體上合成抗生素含非蛋白質(zhì)氨基酸（D-氨基酸），多

3、為鎖環(huán)狀肽鏈；抗菌肽都是L-氨基酸，含有雙親α-螺旋或β-折疊結(jié)構(gòu)的帶正電荷的線性肽鏈，不含其他附加基團(tuán),…抗菌肽與肽類抗生素,糖肽類抗生素抑制細(xì)胞壁的合成；抗菌肽通過與帶負(fù)電荷的微生物細(xì)胞膜直接作用，改變其通透性，造成膜的物理性損傷，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物外滲而死亡抗生素發(fā)揮作用要通過微生物細(xì)胞膜上或胞內(nèi)特異的受體，且受體類型有限，微生物容易通過變異產(chǎn)生耐藥性；抗菌肽是通過陰陽離子的物理作用，可以很快殺滅微生物而不產(chǎn)生耐藥性,抗菌肽的抑菌作

4、用機(jī)理,離子通道模型可變毯模型抑制細(xì)胞壁形成抑制細(xì)胞呼吸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡攻擊線粒體影響細(xì)胞染色體斷裂癌細(xì)胞骨架系統(tǒng)抗菌肽的抗菌機(jī)制應(yīng)該有多種,抗菌肽的作用模式圖,抗菌肽的抗病毒作用機(jī)理,天蠶素能直接與病毒外殼作用，導(dǎo)致病毒外殼的通透性增加裂解病毒顆粒阻斷病毒與細(xì)胞融合抑制病毒復(fù)制,抗菌肽的作用特點(diǎn),抗菌肽作用于細(xì)菌的細(xì)胞膜，使其通透性增大，從而殺滅細(xì)菌。細(xì)菌必需改變膜的結(jié)構(gòu)才能防御抗菌肽的進(jìn)攻，改變膜的結(jié)構(gòu)意味著要改變

5、多個(gè)基因只對原核生物細(xì)胞和病變真核生物細(xì)胞有抑制作用，真核生物細(xì)胞膜含有大量的膽固醇，使膜結(jié)構(gòu)趨于穩(wěn)定，高等動物細(xì)胞存在高度發(fā)達(dá)的細(xì)胞骨架系統(tǒng),抗菌肽在水產(chǎn)上的研究,1、1988年Nakamura T等首次對海洋生物亞洲鱟提取純化，獲得鱟肽素，低濃度能抑制革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌的生長。2、Azumi K等(1990)從一種海鞘的血細(xì)胞中分離獲得抗菌肽Haloyaminen，并試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其可抑制某些魚RNA病毒和某些海水細(xì)菌的生長 。,抗

6、菌肽在水產(chǎn)上的研究,3、1997年Destoumieux等從養(yǎng)殖南美白對蝦血細(xì)胞和血漿中分離到了幾種抗菌活性因子，其中3種具有抗真菌、細(xì)菌尤其是革蘭氏陽性菌的能力 4、 1996年，以色列學(xué)者Oren從豹鰨體內(nèi)分離得到Pardaxin此肽具有比蜂毒素更強(qiáng)的抗菌活性和更低的人紅血球溶血活性5、Mitta等從兩種貽貝中分離到多種抗菌肽,抗菌肽在水產(chǎn)上的研究,黃平等研究了草魚腸道的抗菌肽37℃，30分鐘，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和嗜水氣

7、單胞菌的細(xì)胞膜皺縮破裂胰蛋白酶消化37℃、 16小時(shí)，對其結(jié)構(gòu)和抑菌活性無影響100 ℃，30分鐘對其抑菌活性無影響,抗菌肽在水產(chǎn)上的研究,李思明等（2007）從稚鱷龜組織提取的抗菌肽對有效抑制沙門氏菌和嗜水氣單胞菌劉慧明等（2008）研究鱟抗菌肽對隱球菌和枯草芽孢桿菌具有抑制作用，而對變形桿菌無效,1、姜蘭等（2002）研究發(fā)現(xiàn)，抗菌肽對水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中常見病原菌—嗜水氣單胞菌、梅氏弧菌、遲鈍愛德華氏菌及溫和氣單胞菌均有較好的抑菌

8、效果,抗菌肽在水產(chǎn)動物的應(yīng)用,2、黃自然等（2005）比較了抗菌肽、金霉素和空白對照對南美白對蝦的效果，認(rèn)為：抗菌肽在對蝦飼料或水體中能控制水中的微生物，使致病微生物如弧菌等均能殺滅，通過飼料攝入蝦體內(nèi)可以促進(jìn)生長和提高免疫力,抗菌肽在水產(chǎn)動物的應(yīng)用,3、王廣軍等（2005）等在飼料中添加抗菌肽。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：飼料中添加抗菌肽對南美白對蝦的生長有顯著影響，平均終末體重比對照組提高了23%，日生長速度提高了58%，相對增重率提高了19

9、%，成活率提高了9%，飼料系數(shù)降低了13%,抗菌肽在水產(chǎn)動物的應(yīng)用,抗菌肽在水產(chǎn)動物的應(yīng)用,李清等（2004）在草魚飼料中添加抗菌肽可提高生長速度、存活率，促進(jìn)礦物元素的吸收和利用劉福星等（2004）在凡納濱對蝦飼料中添加抗菌肽，生長速度、飼料轉(zhuǎn)化率、成活率和飽滿度均提高了,抗菌肽在羅非魚飼料中的應(yīng)用,天蠶素抗菌肽－水產(chǎn)飼料添加劑,抗菌肽在大黃魚飼料中的應(yīng)用,,FDA僅批準(zhǔn)土霉素和磺胺二甲氧嗪(Ormetoprim)用于水產(chǎn)動物藥物添

10、加劑允許使用的飼料添加劑品種目錄 禁止在飼料和動物飲用水中使用的藥物品種目錄,試驗(yàn)一 CAD對羅非魚幼魚生產(chǎn)性能的影響（2000尾，集美大學(xué)，2009年，56天）,,（共4個(gè)處理，每個(gè)處理10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾）,試驗(yàn)二 抗菌肽與幾種常用促生長抗生素效果對比試驗(yàn)（800尾，集美大學(xué)，2009年，56天）,注：肽合素為抗菌肽的商品名,試驗(yàn)三 抗菌肽對大黃魚的影響,試驗(yàn)對象：大黃魚幼魚（32g）試驗(yàn)地點(diǎn) ：福建省寧德市

11、某大型養(yǎng)殖場試驗(yàn)設(shè)計(jì)：對照組（25%大蒜素，150g/t;三黃粉125g/t ）、抗菌肽100g/t試驗(yàn)設(shè)備：浮伐式網(wǎng)箱（4×8×3.5m ）試驗(yàn)時(shí)間：2009.10.25—2009.12.20（共56天）,試驗(yàn)網(wǎng)箱,試驗(yàn)結(jié)果,,飼料中添加100ppm抗菌肽可以明顯提高水產(chǎn)動物的生長速度，降低飼料效率，提高性價(jià)比。,天蠶素抗菌肽－水產(chǎn)藥物,預(yù)防用藥治療用藥消毒用藥,水產(chǎn)藥物的應(yīng)用現(xiàn)狀,,現(xiàn)狀專業(yè)漁藥生產(chǎn)企

12、業(yè)300多家，品種500多個(gè)，產(chǎn)量2.5萬噸，產(chǎn)值4億多元。種類：消毒劑、驅(qū)殺蟲劑、水質(zhì)（底質(zhì)）改良劑、抗菌藥、中草藥漁民基本上靠漁藥控制水產(chǎn)動物疾病漁藥的安全使用是一個(gè)重要的社會問題,,存在的問題漁藥藥理學(xué)等理論研究薄弱，難于制定科學(xué)的殘留限量、給藥劑量、休藥期、使用規(guī)范等。有效安全的漁藥及其劑型貧乏，制劑的工藝水平低。散劑占85%以上，輔料多借用人獸藥。漁藥市場競爭無序、混亂現(xiàn)象嚴(yán)重。2005年，華東地區(qū)漁藥引起的死魚事