內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)溶液配制

1、人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的分離與培養(yǎng)人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的分離與培養(yǎng)試劑：試劑：血清、胰蛋白酶膠原酶、PRMI培養(yǎng)粉、青、鏈霉素三蒸水、EDTA(乙二胺四乙酸二鈉乙二胺四乙酸二鈉)、HCL、NaOH、NaCL、KCL、Na2HPO4.H2O、NaHCO3、臺(tái)盼藍(lán)器材：器材：超凈工作臺(tái)、壓力蒸汽消毒器、電熱干燥箱、濾器、CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、手術(shù)器械、水浴鍋、溫度計(jì)、磁性攪拌器、離心機(jī)、電子天平、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板耗材：耗材：儲(chǔ)存瓶、培養(yǎng)瓶，吸管、

2、滴管，燒杯、量筒、粗細(xì)線(xiàn)、牛皮紙、飯盒、靜脈插管、膠塞、離心管溶液配制溶液配制1水：新鮮配置的三蒸水水：新鮮配置的三蒸水2PBS平衡鹽溶液（工作液液）平衡鹽溶液（工作液液）NaCL80.0gKCL4.0gNa2HPO4.H2O0.6gKH2PO40.6g以上藥品溶于1000ml三蒸水。NaHCO3調(diào)PH到7.2，工作臺(tái)內(nèi)過(guò)濾后分裝，－20℃凍存。4℃解凍備用。1.取產(chǎn)后健康新生兒臍帶（取產(chǎn)后健康新生兒臍帶（4DHanks保存），6小時(shí)內(nèi)

3、操作；小時(shí)內(nèi)操作；2.超凈工作臺(tái)上無(wú)菌操作：超凈工作臺(tái)上無(wú)菌操作：操作端插上無(wú)菌靜脈插管，細(xì)線(xiàn)固定，用注射器將操作端插上無(wú)菌靜脈插管，細(xì)線(xiàn)固定，用注射器將DHanks沖洗臍靜脈到無(wú)血液為止；洗臍靜脈到無(wú)血液為止；夾閉另一端，工作端注入夾閉另一端，工作端注入37℃預(yù)熱的胰蛋白酶℃預(yù)熱的胰蛋白酶10ml（37℃水浴℃水浴鍋消化鍋消化10’）；消化液收入到加有血清培養(yǎng)液的離心管，消化液收入到加有血清培養(yǎng)液的離心管，31000rpm離心離心10