個體化HLA-A2限制性腫瘤抗原肽的篩選方法建立及其在結(jié)腸癌抗原肽中的研究.pdf

1、近幾年免疫檢查點抗體治療取得了巨大成功，但仍有超過50％的腫瘤患者未能對阻斷治療作出反應。同時，精準醫(yī)學依靠驗證過的生物標志物來更好地預測及劃分患者可能的疾病風險，從而預先對治療做出反應，這使尋找可靠的腫瘤抗原肽變得尤為重要。新技術(shù)（如第二代測序）的出現(xiàn)為腫瘤免疫學尋找新的免疫靶標提供了新的手段，使免疫治療廣泛地應用到腫瘤患者。在本論文中，將重點討論腫瘤免疫治療中腫瘤抗原肽的鑒定。惡性腫瘤自身抗原的表達可以激發(fā)腫瘤的免疫反應，腫瘤抗原肽

2、特異性的免疫治療可以推動腫瘤的消失。但是，目前鑒定出的腫瘤抗原肽特異性免疫治療效果并不理想，尚需獲得更有效的自身腫瘤抗原進行臨床試驗，使利用腫瘤疫苗或免疫療法治愈腫瘤成為可能。
　　本研究使用一種聯(lián)合色譜、質(zhì)譜及生物信息學預測分析的生化方法，以結(jié)腸癌腫瘤組織為研究對象，從免疫親和純化過的人類白細胞抗原-A2(Human leukocyteantigen-A2，HLA-A2)分子中獲得12條結(jié)腸癌抗原肽即為CC1至CC12。由于無法

3、大量獲得天然的抗原肽，進而采取化學合成的方法，并測試它們是否可用于穩(wěn)定細胞表面產(chǎn)生的主要組織相容性復合體（Major histocompatibility complex，MHC）分子，并分析其引起細胞毒性T淋巴細胞（Cytotoxic lymphocyte，CTL）免疫反應的能力。結(jié)果表明，該篩選抗原肽的方法有效。在混合肽檢測結(jié)果中，混合肽(CC1、CC2、CC3、CC4)相對于空白對照組有顯著性差異，可以認為CC1-4中至少有一個多

4、肽是此腫瘤病人的結(jié)腸癌抗原肽。在單個肽檢測結(jié)果中，CC1、CC9、CC10、CC11、CC12產(chǎn)生的γ-干擾素（Interferon-γ，IFN-γ）量皆有一定幅度的增加，CC2、CC5、CC6、CC7、CC8產(chǎn)生的IFN-γ量并無明顯差異。基于混合肽中，僅有CC1-4有明顯殺傷結(jié)果，推測此方法篩選出的結(jié)腸癌抗原肽CC1為此患者的結(jié)腸癌抗原肽，其余的CC9、CC10、CC11、CC12可能殺傷效果并不突出或者此檢測方法并沒有反映出他們的