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文檔簡介
1、目的:外源基因在生精細胞中難以表達,腮腺炎病毒(mumps virus,MuV)不能在生精細胞中復(fù)制,提示生精細胞具有抵御外源基因及MuV感染的能力,但其機制并不清楚,本論文對此進行了初步探討,重點研究了自噬在其中的作用。
材料與方法:分離C57雄性小鼠不同階段的生精細胞,利用表達熒光蛋白的腺病毒載體和腮腺炎病毒(mumps virus,MuV)感染生精細胞。實時定量RT-PCR檢測基因mRNA水平的表達,Western-bl
2、ot測定基因的蛋白表達水平,免疫組織化學(xué)與免疫熒光定位蛋白的分布。
結(jié)果:腺病毒熒光蛋白可以在Sertoli細胞、Leydig細胞及早期精原細胞中表達,但不能在圓形精子細胞中表達。自噬相關(guān)基因Beclin-1及LC3在生精細胞中高表達。雷帕霉素(Rapamycin,Rap)促進細胞自噬后,可以抑制Sertoli細胞和Leydig細胞表達熒光蛋白;而3-甲基嘌呤(3-Methyladenine,3MA)抑制生精細胞自噬后,可以促
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