二氫丹參酮Ⅰ對NF-κB信號通路作用機制及其抗腫瘤作用研究.pdf

1、NF-κB是一類關(guān)鍵性的核轉(zhuǎn)錄因子，一般在各種細(xì)胞中都有且以非活化的同源二聚體或異源二聚體的形式存在于胞質(zhì)中，具有十分重要的功能。眾所周知，NF-κB是多種信號途徑中的重要的一環(huán)，擁有許多的生物學(xué)活性，與許多各種生理的以及病理的過程有關(guān)，比如炎癥、腫瘤等，參與以及調(diào)控細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡等的相關(guān)過程。由此可知，通過抑制NF-κB為核心的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，可能為防治某些疾病開辟新途徑。
　　二氫丹參酮Ⅰ是從唇形科植物丹參中提取出來的一種天

2、然產(chǎn)物，紅色針狀結(jié)晶，具有抗菌、抗炎、抗腫瘤活性。本次研究主要利用Hela細(xì)胞給予不同濃度的二氫丹參酮Ⅰ檢測其對NF-κB活化的影響，以及檢測了其對細(xì)胞凋亡的影響;其次是利用裸鼠移植瘤實驗來檢測二氫丹參酮Ⅰ對腫瘤增殖的影響。其中，噻唑藍(lán)比色分析法(MTT)主要檢測藥物對Hela細(xì)胞的毒性大小;利用熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測藥物對NF-κB轉(zhuǎn)錄活性的影響;蛋白免疫印跡實驗則在蛋白水平上檢測了藥物對NF-κB蛋白表達(dá)及其靶蛋白表達(dá)的影響;通過

3、RT-PCR實驗在RNA水平上檢測藥物對IL-6/TNF-α/VEGF mRNA表達(dá)的影響;免疫熒光試驗主要檢測藥物對p65核移位的影響;通過流式細(xì)胞術(shù)檢測藥物對Hela細(xì)胞凋亡率的影響;體內(nèi)試驗中，通過建立裸鼠移植瘤模型檢測藥物對腫瘤增殖的影響。
　　熒光素酶報告基因及MTT實驗證明，二氫丹參酮Ⅰ可抑制NF-κB的活化且沒有明顯的細(xì)胞毒性。通過蛋白免疫印跡實驗得出二氫丹參酮Ⅰ可劑量性的抑制IκBα的磷酸化和降解，抑制p65的磷酸