多發(fā)性骨髓瘤髓外病變患者M(jìn)YC激活的預(yù)后意義及其分子機(jī)制探討.pdf

1、目的:
　　多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種惡性血液系統(tǒng)腫瘤，髓外病變(EMD)是其表現(xiàn)形式之一，往往提示預(yù)后不良。EMD患者的預(yù)后有很大異質(zhì)性，其發(fā)病機(jī)制、危險(xiǎn)因素并不明確，細(xì)胞遺傳學(xué)異常是目前研究的熱點(diǎn)。MYC是重要的原癌基因，基因重排常見于高度侵襲性腫瘤，近年來發(fā)現(xiàn)其異常與MM疾病進(jìn)展相關(guān)，可被Muc1、Pyk2等基因激活，但MYC在EMD和MM預(yù)后中的意義目前仍缺乏大宗報(bào)道。本研究主要目的:(1)研究MYC異常及蛋白表達(dá)水平與E

2、MD的相關(guān)性，探討其在MM中的預(yù)后意義。(2)比較EMD及孤立性漿細(xì)胞瘤(SP)患者的細(xì)胞遺傳學(xué)異常，探討漿細(xì)胞克隆演變在EMD發(fā)生中的作用。(3)利用骨髓瘤細(xì)胞系體外研究Pyk2和Muc1對MYC的影響，探究髓外病變中MYC激活的可能機(jī)制。
　　方法:
　　研究納入北京協(xié)和醫(yī)院2008年1月至2015年11月初診的患者。采用病例對照分析方法收集髓外病變(EMD)和非髓外病變(nonEMD)患者，熒光原位雜交(FISH)方法

3、研究骨髓懸液MYC異常;免疫組織化學(xué)(IHC)方法研究骨髓病理標(biāo)本中Myc、Muc1、Pyk2蛋白表達(dá)情況。選取EMD患者髓外漿細(xì)胞瘤病理標(biāo)本，以同期經(jīng)北京協(xié)和醫(yī)院病理科診斷的孤立性漿細(xì)胞瘤標(biāo)本(SP)作為對照，F(xiàn)ISH方法研究其MYC異常，1q21擴(kuò)增、8p21缺失、RB1缺失、D13S319缺失、P53缺失、IGH重排，IHC方法研究Myc、Muc1、Pyk2蛋白表達(dá)情況。體外研究采用MM細(xì)胞系U266、RPMI8226及漿細(xì)胞白血

4、病(PCL)細(xì)胞系NCI-H929，研究Myc抑制劑、Pyk2抑制劑和硼替佐米對細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲性的影響。
　　結(jié)果:
　　1.對65例nonEMD患者和42例EMD患者的初診骨髓標(biāo)本檢測MYC重排及Myc、Muc1和Pyk2蛋白表達(dá)情況。兩組患者總生存期(OS)存在顯著差異（未達(dá)vs24月，p=0.021）。MYC重排在nonEMD組和EMD組發(fā)生率分別為20.0％和33.3％(p=0.121)，在非骨旁EMD中發(fā)生率

5、(42.3％)(p=0.029)，MYC重排和1q21擴(kuò)增雙陽性在nonEMD組和EMD組發(fā)生率分別為6.2％和23.8％(p=0.025)。MYC重排陽性者中位生存期為15.4月，MYC重排陰性者中位生存期未達(dá)(p＜0.001)。單純1q21擴(kuò)增或8p21缺失并不顯著降低患者生存，但MYC重排合并1q21擴(kuò)增或8p21缺失中位生存期顯著縮短，分別為11.0月(p=0.001)和11.0月(p=0.010)。多因素分析發(fā)現(xiàn)MYC重排陽性

6、為MM預(yù)后差的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(p＜0.001)。免疫組化結(jié)果:新診斷MM患者骨髓Myc高表達(dá)在nonEMD組和EMD組分別為15.7％和48.2％(p＜0.001)，Muc1高表達(dá)在nonEMD組和EMD組發(fā)生率分別為16.3％和35.2％(p=0.030)。在Muc1高表達(dá)組Myc表達(dá)水平顯著升高(34.2％vs20.8％，p=0.010)，Pyk2高表達(dá)組Myc表達(dá)水平顯著升高(29.6％vs18.0，p=0.011)。Myc蛋白表達(dá)

7、與基因異常并不完全吻合。
　　2.對32例EMD及14例SP漿細(xì)胞瘤病理組織行FISH檢測，EMD中MYC重排(46.7％vs14.3％，p=0.038)、1q21擴(kuò)增(65.5％vs14.3％，p=0.002)、8p21缺失(37.9％vs0％, p=0.008)、RB1缺失(65.5％vs14.3％,p=0.001)、D13S319(58.6％vs21.4％，p=0.022)、P53缺失(37.9％vs0％，p=0.008)、

8、IGH重排(48.3％vs7.1％，p=0.015)發(fā)生率均顯著高于SP組。大部分EMD患者髓外組織與骨髓組織相比，漿細(xì)胞出現(xiàn)新的細(xì)胞遺傳學(xué)異常。Myc蛋白高表達(dá)率在EMD組高于SP組(43.3％vs16.7％)，但無顯著性差異(P=0.103)。一例MYC陽性的SP組患者最終在兩年內(nèi)進(jìn)展至活動性骨髓瘤。
　　3.抑制Myc可降低MM細(xì)胞的侵襲能力，抑制Pyk2可降低細(xì)胞Myc表達(dá)水平，降低細(xì)胞侵襲能力。
　　結(jié)論: