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文檔簡介
1、目的:
沉默SAA基因在鼻咽癌CNE2細胞中的表達,研究分析SAA基因表達降低,對CNE2細胞生長增殖、BCL-2、Caspase-3及NF-КB表達的影響,初步探討SAA基因的功能及分子機制。
方法:
本研究將前期已成功構建的SAA表達干擾載體pGPU6/GFP/Neo-SAA,采用脂質體法轉染 CNE2細胞,G418篩選,克隆挑選,建立SAA穩(wěn)定低表達的pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細胞系
2、,以pGPU6/GFP/Neo-CNE2細胞系、未轉染的CNE2細胞系為對照組;運用流式細胞儀檢測三組細胞的細胞周期改變;使用平皿克隆實驗,檢測細胞的生長增殖能力;以western blotting檢測BCL-2、Caspase-3及NF-КB在pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細胞系的表達水平。
結果:
1、western blotting檢測結果示,SAA在pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細
3、胞系中表達降低;
2、流式細胞儀檢測結果顯示,在 pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細胞系中,處于分裂期的CNE2細胞數目減少;
3、平皿克隆實驗結果顯示,pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細胞的生長增殖能力降低;
4、western blotting檢測結果示,pGPU6/GFP/Neo-SAA-CNE2細胞系中的BCL-2表達降低,Caspase-3及NF-КB的表達增多。
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