基于分子印跡技術對苦參堿的分離及其衍生物的藥代動力學研究.pdf

1、山豆根富含生物堿、皂苷、黃酮和多糖等成分，主要分布于我國廣西壯族自治區(qū)的西南部至西北部，因其具有清熱解毒、消腫止痛、抗炎、抗腫瘤等藥理活性受到廣泛的關注。其中以苦參堿(MT)為代表的喹諾里西啶(Quinolizidine)類生物堿，包括MT、氧化苦參堿(OMT)、槐果堿(SC)和氧化槐果堿(OSC)等為山豆根藥材的主要活性成分，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、抗病毒、抗炎、抗腫瘤等方面具有重要的藥理活性和應用前景。
　　對MT的測定、

2、提取工藝及其衍生物的藥物代謝規(guī)律進行探索研究，可為藥材的質量控制，MT單體的獲取，以及以MT為先導化合物的結構修飾提供科學依據(jù)。本文以廣西盛產(chǎn)藥材山豆根為研究對象，采用三重四級桿液質聯(lián)用儀對其生物堿含量進行測定，建立藥材中總MT的含量測定方法。制備熱敏型分子印跡聚合物，并將其作為吸附劑應用于MT的提取分離過程中。將MT和4個活性較高的MT衍生物進行大鼠肝微粒體孵化實驗及藥代動力學研究，探索藥物活性與體內過程的關系。
　　本文獲得以

3、下幾個方面主要結果:
　　(1)實驗運用HPLC MS/MS聯(lián)用技術分析測定了山豆根中MT型生物堿含量，包括MT、SC、OSC和OMT，結果表明山豆根中的MT型生物堿普遍以OMT形式存在，占4者總量的61.68％～80.83％，MT的量與OSC量相當，分別占8.16％～19.39％和9.86％～23.36％，此外還含有少量SC，含量小于1.15％。
　　(2)實驗首次建立了以50％乙醇作為媒介，采用添加還原劑的HPLC含量測

4、定方法，以總MT作為指標，利用反相色譜柱進行快速的測定，出峰時間約為6.5 min，結果顯示，其總MT的含量與原藥典測定方法中MT與OMT總量相比，增加了0.08～0.29％，且與LCMS測定的4種生物堿之和基本相符，可為藥材質量控制以及提取工藝提供參考。
　　(3)首次制備了熱敏型MT分子印跡聚合物，結果顯示熱敏單體N-異丙基丙烯酰胺與交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯比例為1∶1時，聚合物具有較好的特異性吸附，其低臨界相轉變溫度在35

5、～40℃之間;將其與提取提取耦合可以保持提取過程中藥材與提取液中MT的濃度差，提高MT溶出效率;對添加熱敏型分子印跡聚合物作為吸附劑前后的MT溶出曲線進行擬合，以Weibull及Logistic模型對溶出曲線進行分析，結果說明以熱敏型分子印跡聚合物可顯著提高藥材溶出效率，增加最大飽和溶出量，即針對目標化合物的特異性吸附可以在提取過程中顯著提高提取效率;以不同溫度的水作為洗脫劑，通過程序洗脫步驟即可獲得純度89％以上的MT水溶液。

6、　　(4)對MT及4個衍生物進行大鼠肝微粒體孵化實驗，結果表明雙鍵與MT相連的14-噻吩基次亞甲基苦參堿（TMM）發(fā)生生物降解，并發(fā)現(xiàn)其降解產(chǎn)物MT;而單鍵與MT相連的14-(3-甲基芐基)苦參堿(3MBM)，14-(4-甲基芐基)苦參堿(4MBM)，14-(2-萘甲基)苦參堿（28＃）均未發(fā)生生物降解。
　　(5)以相同劑量的TMM和MT進行藥代動力學研究，得出藥代動力學參數(shù)顯示TMM在體內轉化為MT，且生物利用度高于MT，將M

7、T的半衰期從7.80 h延長至18.84 h。4個MT衍生物中，只有TMM在體內代謝為MT，說明14-位上的雙鍵可使其進行生物降解。
　　(6)以相同劑量的3MBM及4MBM進行藥代動力學研究，結果二者血藥濃度特征相似，說明其體內代謝過程相同。結合藥理實驗結果可以認為3MBM14-位芐基苯環(huán)上間位的取代，可提高其抗腫瘤活性。
　　(7)大鼠肝微粒體孵化實驗和藥代動力學研究及藥理實驗表明，隨著化合物脂水分配系數(shù)LogP增大，其