磷酸肌酸鈉對阿霉素損傷乳鼠心肌細胞GRP78 mRNA及miR-378-378-表達的影響.pdf

1、目的：
　　探討磷酸肌酸鈉對阿霉素損傷乳鼠心肌細胞GRP78 mRNA、miR-378及miR-378*表達的影響。
　　方法：
　　選用健康新生1~3日齡的SD乳鼠（雌雄不拘），用酶聯(lián)合消化法（0.1％Ⅱ型膠原酶+0.1%胰蛋白酶）對新生乳鼠的心肌組織進行消化，使細胞分離出來，用差速帖壁法除去主要干擾成分成纖維細胞，提高心肌細胞純度。將心肌細胞濃度調(diào)整到5×104個/ml，把培養(yǎng)箱條件設置為37℃、5%CO2，密閉培

2、養(yǎng)72小時。運用免疫組織化學技術檢測乳鼠心室肌細胞特有的α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）鑒定心肌細胞的純度，然后隨機分為3組：
　　①正常對照（CON）組：正常心肌細胞；
　?、诎⒚顾負p傷組（DOX）組：正常心肌細胞+阿霉素3mg/L；
　?、哿姿峒∷徕c治療（CPS）組：正常心肌細胞+阿霉素3mg/L+磷酸肌酸鈉10mmol/L。使用電子顯微鏡（JEOL1200）分別對各組心肌細胞的超微結構進行差異分析。各組原代培養(yǎng)乳

3、鼠心肌細胞的GRP78 mRNA、miR-378及miR-378*的含量運用實時熒光定量-聚合酶鏈式反應（Real-time PCR）技術測定。實驗數(shù)據(jù)運用SPSS20.0軟件進行處理和統(tǒng)計學分析。
　　結果：
　　1、與正常對照組相比較，阿霉素損傷組乳鼠心肌細胞線粒體腫脹和空泡化頻繁多見，肌原纖維排列紊亂，溶解破壞，片狀消失，細胞超微結構破壞程度嚴重；與阿霉素損傷組相比，磷酸肌酸鈉治療組心肌細胞超微結構的破壞程度顯著減輕，

4、基本趨于正常。
　　2、與正常對照組相比較，阿霉素損傷組心肌細胞GRP78 mRNA表達明顯增加(p<0.01)；與阿霉素損傷組相比較，磷酸肌酸鈉治療組心肌細胞GRP78 mRNA表達減少(p<0.05)。
　　3、與正常對照組相比較，阿霉素損傷組心肌細胞miR-378及miR-378*表達減少(p<0.05)；與阿霉素損傷組相比較，磷酸肌酸鈉治療組心肌細胞miR-378及miR-378*表達增加(p<0.05)。