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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
補(bǔ)體具有多種生物學(xué)功能,廣泛參與機(jī)體抗微生物防御反應(yīng)以及免疫調(diào)節(jié),另一方面也造成免疫病理損傷。隨著補(bǔ)體研究的不斷深入,膜攻擊復(fù)合物在多種腎臟疾病的組織和尿液中檢出,甚至發(fā)現(xiàn)系膜細(xì)胞增生具有補(bǔ)體依賴性。系膜區(qū)沉積的IgA可能通過活化補(bǔ)體來激活人系膜細(xì)胞(HMC)、導(dǎo)致IgA腎病(IgAN)腎小球損傷的機(jī)制受到越來越多的關(guān)注。本研究旨在明確MBL在IgAN發(fā)病中的作用,探討甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)、MBL絲氨酸蛋白酶
2、(MASP-1)沉積與兒童IgAN臨床表現(xiàn)、病理改變的關(guān)系,進(jìn)一步探討局部沉積的MBL來源,為臨床有效的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
1用ELISA方法檢測(cè)20例IgAN患兒和正常兒童血清的MBL水平,免疫組化檢測(cè)53例IgA腎病、23例非IgA沉積腎小球疾病患兒腎組織甘露聚糖結(jié)合凝集素(MBL)、MBL相關(guān)的絲氨酸蛋白酶-1(MASP-1)、C3、C1q、IgA和C5b-9的表達(dá),了解有無MBL-MASP-1
3、2途徑補(bǔ)體活化參與IgAN發(fā)病。
2.回顧性分析MBL-MASP-1沉積陽性組和MBL-MASP-1沉積陰性組患兒不同臨床表現(xiàn)的差異;分析IgAN的MBL沉積強(qiáng)度與病理分級(jí)的相關(guān)性,了解不同程度補(bǔ)體活化與IgAN病理損害的關(guān)系。
3.用含有IgA腎病病人血清體外培養(yǎng)人系膜細(xì)胞(HMC),隨機(jī)分為0小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí)組,取上清液,用ELISA方法檢測(cè)各組細(xì)胞上清液甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)水平和R
4、T-PCR方法檢測(cè)細(xì)胞MBLmRNA表達(dá),了解系膜細(xì)胞在凝集素途徑補(bǔ)體活化中的作用。
結(jié)果:
1.1第一部分補(bǔ)體活化的凝集素途徑在IgAN發(fā)病中作用
1.22例IgAN患兒腎小球有MBL、MASP-1、C3和C5b-9沉積,23例非IgA沉積腎臟疾病患兒均無MBL和MASP-1沉積;系膜區(qū)MBL沉積強(qiáng)度與IgA沉積強(qiáng)度之間存在正相關(guān)關(guān)系(rs=0.865),但與IgAN病理分級(jí)無關(guān);
5、 2.IgA腎病患兒血清MBL水平和對(duì)照組統(tǒng)計(jì)學(xué)無明顯的差異。
3.MBL-MASP沉積陽性組患兒蛋白尿水平顯著高于MBL-MASP沉積陰性組,肉眼血尿更為多見。
1.2第二部分系膜細(xì)胞對(duì)補(bǔ)體活化的凝集素途徑在IgA腎病發(fā)病作用中的影響
1.四組細(xì)胞上清液比較,0-12小時(shí)MBL,水平降低,統(tǒng)計(jì)學(xué)有差異(p=0.003);12-24小時(shí)MBL水平升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)有差異(p<0.001)。
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