前病毒激活劑與補(bǔ)體活化劑的聯(lián)合使用在清除HIV-1病毒庫(kù)中的作用.pdf

1、目前研究普遍認(rèn)為HIV-1潛伏庫(kù)是根除和治療HIV-1感染的主要障礙。歸其原因，主要是由于HIV-1病毒顆粒和感染的細(xì)胞會(huì)利用其表面的補(bǔ)體活化調(diào)節(jié)蛋白(RCA)去逃避抗體依賴補(bǔ)體介導(dǎo)的裂解(ADCML)。為了識(shí)別并根除這些病毒顆粒和感染的細(xì)胞，我們聯(lián)合使用了前病毒激活劑和CD59（一個(gè)重要的RCA組成成分）阻斷劑去觸發(fā)這種抗體依賴補(bǔ)體介導(dǎo)的裂解(ADCML)。這些前病毒激活劑包括羅米地辛(RMD)、辛二酰苯胺異羥戊酸(SAHA)和酪氨酸

2、激酶抑制劑(prostratin)。選擇這些藥物的原因是由于它們不僅能夠激活潛伏感染的T細(xì)胞系(ACH-2)和原代CD4+T細(xì)胞中的前病毒，而且能使這些細(xì)胞產(chǎn)生病毒顆粒以及增強(qiáng)細(xì)胞表面病毒蛋白的表達(dá)。本研究中我們發(fā)現(xiàn)RMD是一種很具有臨床應(yīng)用前景的藥物。首先，在毫微摩爾濃度下，它便能有效激活前病毒。其次，在激活的ACH-2和原代靜息CD4+T細(xì)胞中，前病毒表達(dá)的HIV-1 Env與細(xì)胞表面脂筏結(jié)構(gòu)上的CD59存在共定位，而且CD59阻斷

3、劑與抗HIV-1單克隆抗體或HIV-1病人血漿的聯(lián)合使用能夠使激活的ACH-2和原代靜息CD4+T細(xì)胞對(duì)ADCML敏感。
　　相關(guān)文獻(xiàn)表明RCA生物學(xué)功能的阻斷，尤其是CD59（一種在補(bǔ)體激活終末階段決定膜攻擊復(fù)合物形成的蛋白），能使HIV-1病毒顆粒和感染的細(xì)胞變得對(duì)病毒感染不同階段的抗Env抗體以及病人血清或血漿介導(dǎo)的ADCML敏感。在HIV-1感染的患者中，盡管針對(duì)病毒的特異性抗體反應(yīng)在各個(gè)階段都較強(qiáng)，但這種較強(qiáng)的抗體反應(yīng)對(duì)

4、于控制病毒的增殖作用甚微。所以針對(duì)抗HIV-1中和抗體(nAbs)，非中和抗體(non-nAbs)或者兩者是否能夠增強(qiáng)CD59阻斷后ADCML的研究，對(duì)于HIV-1的治療非常重要。在本實(shí)驗(yàn)中，我們應(yīng)用了目前廣泛認(rèn)可的nAbs（2G12，2F5和4E10）和non-nAbs(2.2C，A32，N5-i5和N12-i15)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:所有的nAbs和兩種non-nAbs（N5-i5和A32）都能夠與HIV-1 R5，X4和R5/X4嗜性

5、毒株，6種原代分離株以及前病毒被激活的ACH-2細(xì)胞明顯反應(yīng)，相比而言，non-nAbs(2.2C)對(duì)這些靶標(biāo)的作用相對(duì)較弱，N12-i15對(duì)其不作用。但對(duì)于反應(yīng)的抗體而言，不管其是否有中和作用，CD59功能的阻斷都能顯著性地增強(qiáng)其特異性的ADCML，而且這種ADCML效應(yīng)與抗體對(duì)其靶標(biāo)的反應(yīng)強(qiáng)度呈正相關(guān)。因此，對(duì)于修復(fù)nAbs和non-nAbs所觸發(fā)的針對(duì)HIV-1病毒顆粒和前病毒激活的潛伏感染細(xì)胞的ADCML而言，RCA功能的阻斷也