亞胺培南和美羅培南體外誘導(dǎo)銅綠假單胞菌耐藥的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 體外誘導(dǎo)銅綠假單胞菌亞胺培南、美羅培南耐藥；分析兩種抗生素誘導(dǎo)耐藥情況有無(wú)差異及對(duì)其他常用抗生素的敏感率有無(wú)變化；檢測(cè)兩種誘導(dǎo)耐藥株高突變性菌株的檢出情況并比較有無(wú)區(qū)別。 方法： 1.所有菌株均經(jīng)MicroScan WalkAway-96微生物分析儀鑒定，使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)(K-B法)篩選出亞胺培南和美羅培南敏感菌株，E-test試驗(yàn)檢測(cè)其MIC值。 2.耐藥菌株誘導(dǎo)試驗(yàn)：采用低濃度肉湯傳代誘導(dǎo)法，

2、將細(xì)菌在含1/4 MIC濃度亞胺培南或美羅培南的腦心浸液肉湯中連續(xù)傳代培養(yǎng)25次，篩選出耐藥株并用E-test試驗(yàn)檢測(cè)其MIC值，同時(shí)采用K-B法檢測(cè)耐藥株對(duì)其他抗生素的敏感性。 3.高突變性菌株檢測(cè)：將誘導(dǎo)耐藥株稀釋成不同濃度的菌液，分別接種于含或不含300ug/ml利福平的Luria-Bertani(LB)瓊脂上，培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)菌落數(shù)，計(jì)算突變頻率。如果待測(cè)菌株突變頻率比參考菌株高20倍以上，則認(rèn)為該菌株為高突變株。

3、 結(jié)果： 1.在80株銅綠假單胞菌中，經(jīng)亞胺培南誘導(dǎo)，有56株變?yōu)槟退?，誘導(dǎo)率為70.0％；經(jīng)美羅培南誘導(dǎo)，有44株變?yōu)槟退?，誘導(dǎo)耐藥率為55.0％，兩者誘導(dǎo)率之間有差別(P<0.05)。 2.誘導(dǎo)后所有菌株對(duì)誘導(dǎo)抗生素本身MIC均有不同程度升高，同時(shí)對(duì)其他抗生素的敏感率均有下降。亞胺培南誘導(dǎo)耐藥株對(duì)頭孢他啶、頭孢吡肟、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦和頭孢哌酮/舒巴坦的敏感率均在50％以下，而美羅培南誘導(dǎo)耐藥株均高于70％

4、；亞胺培南誘導(dǎo)耐藥株對(duì)阿米卡星和環(huán)丙沙星的敏感率為85.7％和75.0％，而美羅培南誘導(dǎo)耐藥株分別為100％和93.75％。 3.在56株亞胺培南誘導(dǎo)耐藥株中，有12株為高突變株，占21.4％；在44株美羅培南誘導(dǎo)耐藥株中，有6株為高突變株，占13.6％，兩者高突變檢測(cè)率之間有差別(P<0.05)。 結(jié)論： 1.亞胺培南和美羅培南在體外均可誘導(dǎo)銅綠假單胞菌耐藥，亞胺培南的誘導(dǎo)耐藥率顯著高于美羅培南。 2.