亞胺培南對(duì)銅綠假單胞菌DNA釋放和形態(tài)的影響.pdf

1、目的:觀察不同濃度亞胺培南對(duì)體外培養(yǎng)銅綠假單胞菌敏感菌株和耐藥菌株釋放DNA及細(xì)菌形態(tài)的影響。
　　 方法:以銅綠假單胞菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株(ATCC27853)和燒傷患者臨床血標(biāo)本分離耐藥菌株(071114)為實(shí)驗(yàn)菌株。選擇亞胺培南為實(shí)驗(yàn)用抗生素，肉湯微量稀釋法檢測(cè)其最低抑菌濃度(MIC)。將不同濃度的亞胺培南分別與上述兩株細(xì)菌在MH肉湯中35℃培養(yǎng)24h，分別取各濃度的上清液經(jīng)DNA電泳法檢測(cè)其細(xì)菌DNA的釋放情況，并用Quanti

2、ty One軟件分析所釋放DNA片段的分子量和含量。沉淀的菌體固定后采用革蘭染色法顯微鏡及DAPI染色激光共聚焦顯微鏡觀察其細(xì)菌形態(tài)學(xué)改變。
　　 結(jié)果:標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC為1-4mg/L，耐藥菌株的MIC為16-32mg/L。亞胺培南作用下銅綠假單胞菌從等于和小于MIC開始釋放小片段DNA，大于1/2MIC僅釋放1條大片段DNA，且含量少，等于1/2MIC可釋放3條DNA片段，但無小片段DNA，小于I/2MIC可釋放4-5條DN

3、A，且含量多。1/16MIC時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)菌株釋放的第1、5條DNA片段含量偏少，第3、4條DNA片段含量偏多，而耐藥菌株與此相反。耐藥菌株與標(biāo)準(zhǔn)菌株相比釋放的DNA片段有所不同，耐藥菌株比標(biāo)準(zhǔn)菌株多釋放一條DNA片段（第2條），分子量為2784bp，耐藥菌株的第1、3、4、5條DNA片段分子量均比標(biāo)準(zhǔn)菌株小。耐藥菌株釋放的第3、4、5條DNA含量明顯高于標(biāo)準(zhǔn)菌株，P＜0.01，其統(tǒng)計(jì)有顯著學(xué)意義。亞胺培南作用下兩株菌體均呈球狀改變，不管在自