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
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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
從地衣類植物長松蘿中可提取出松蘿酸,有研究表明,松蘿酸有抗菌、毒性、抗蟲、抗腫瘤等生物活性,將松蘿酸合成鈉鹽,即松蘿酸鈉后,可使其毒性大幅降低。成纖維細(xì)胞作為創(chuàng)傷修復(fù)的工程師,在這一生理活動中起關(guān)鍵性作用,本次研究,通過對傷口及周圍組織用藥后,通過病理切片觀察傷口及附近組織內(nèi)成纖維細(xì)胞、膠原蛋白含量變化,并應(yīng)用松蘿酸鈉于體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞,從而探究松蘿酸鈉在傷口愈合這一過程中對成纖維細(xì)胞、愈合相關(guān)生長因子等的影響
2、。
實(shí)驗(yàn)方法:
試驗(yàn)采用wistar大鼠,體重約為200-220g,將12只雄性大鼠隨機(jī)分成四組,分別為生理鹽水組(空白組)、慶大霉素組(陽性對照)、溶劑對照組(陰性對照)、松蘿酸鈉組(實(shí)驗(yàn)組)。傷口造模后,每日傷口處涂抹藥物,并測量傷口直徑,計(jì)算愈合率,傷口完全愈合后對比各組愈合率。第二組試驗(yàn)中使用60只大鼠,隨機(jī)分為生理鹽水組(空白組)、慶大霉素組(陽性對照)、溶劑對照組(陰性對照)、松蘿酸鈉組(實(shí)驗(yàn)組)。4組,
3、每組15只,傷口造模和用藥與測傷口愈合率時相同,并在造模完成后第1d、3d、7d、14d、21d進(jìn)行取樣,每組取3只,麻醉致死后取傷口及周圍約3cm組織,進(jìn)行病理切片觀察并做免疫組化檢測。體外實(shí)驗(yàn)以L929細(xì)胞(小鼠成纖維細(xì)胞)為實(shí)驗(yàn)對象,檢測松蘿酸鈉對其增殖、遷移速率、分泌生長因子以及合成膠原的影響。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:
傷口愈合率的比較中,松蘿酸鈉與慶大霉素相似,明顯高于空白組與溶劑對照組。病理切片中可觀察松蘿酸鈉組
4、與慶大霉素組成纖維細(xì)胞含量高于其他兩組,膠原纖維更豐富,排列更緊密。免疫組化的結(jié)果表明,轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)在1d到3d,各組都表現(xiàn)為大量分泌,慶大霉素組與松蘿酸鈉組對比空白組與溶媒組極顯著,7d時出現(xiàn)TGF-β1水平下降,慶大霉素組與松蘿酸鈉組水平下降趨勢更明顯。體外L929細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,松蘿酸鈉對其L929的增殖作用不明顯,單加速了細(xì)胞的遷移,而且促進(jìn)其分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)與膠原的合成。
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