Reelin缺失對小鼠小腦皮質和血管發(fā)育的影響.pdf

1、血管的發(fā)生和細胞極性化的產(chǎn)生對于理解個體的發(fā)育、疾病的產(chǎn)生具有重要的意義。目前，實驗領域主要研究的是研究小腦表觀上面的發(fā)育，對于小腦的皮質生長過程中，由于Reelin蛋白缺失對血管發(fā)育的影響以及細胞極性化的產(chǎn)生所做的研究并不十分清楚。Reelin蛋白是在遷移細胞的過程中充當了終止信號的作用，這種蛋白對細胞片層化和細胞極性化以及血管的形成起著決定性的關鍵作用。我們用正常小鼠（WT）與Reeler小鼠的小腦分別進行尼氏染色，血管灌注和免疫細

2、胞化學的方法進行實驗研究，探討Reelin蛋白的缺失對小腦皮質和血管發(fā)育的影響。
　　目的：觀察Reelin基因缺失的Reeler小鼠小腦浦肯野細胞遷移與極性化的改變以及Reelin基因對小鼠血管生長的影響；探討Reeler小鼠血管的發(fā)生和細胞之間的關系，同時分析這兩種小鼠浦肯野細胞極性化的改變和血管發(fā)育方式的不同。
　　方法：應用免疫細胞化學，尼氏染色技術和墨汁灌注技術標記兩種不同小鼠從 E17到 P21小腦內(nèi)神經(jīng)細胞的發(fā)

3、育情況，并進行形態(tài)學的觀察，同時對Reeler與野生型小鼠小腦皮質內(nèi)血管體密度和浦肯野細胞直徑的大小和角度進行測量與比較。
　　結果：①Reeler小鼠小腦的皮質在發(fā)育過程中片層化發(fā)生了紊亂，沒有形成正常的三層分層結構：外顆粒層（分子層），浦肯野細胞層，內(nèi)顆粒層。②浦肯野細胞在遷移過程中細胞極性發(fā)生了改變，通過對小腦浦肯野細胞直徑的大小和細胞角度改變的測量，發(fā)現(xiàn)不同的小鼠細胞極性發(fā)生了明顯的不同，差異具有統(tǒng)計學意義P<0.05③墨

4、汁灌注的方法顯示兩種小鼠小腦內(nèi)血管的體密度都呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢，根據(jù)發(fā)育過程中血管體密度變化的相關性分析可知：P3和P7時Reeler小鼠血管體密度與WT小鼠相比P<0.05；P14和P21時，Reeler小鼠血管體密度與WT小鼠相比P<0.01，顯示出發(fā)育過程中血管的體密度與年齡有關，差異有顯著統(tǒng)計學意義。另外觀察不同小鼠血管的外觀也有很大的差異。
　　結論：在小腦發(fā)育過程中缺少Reelin蛋白的Reeler小鼠皮質片層化發(fā)生紊

5、亂，神經(jīng)細胞極性發(fā)生改變，血管排列紊亂，體密度與相同年齡點的野生小鼠相比增大，Reelin蛋白在小腦皮質片層化發(fā)育生長的過程中發(fā)揮了至關重要的作用，一方面控制了皮層神經(jīng)細胞形態(tài)結構的改變，并推進了哺乳動物生長發(fā)育的規(guī)律模式，形成了小腦發(fā)育的不同結構；Reelin也是一種支架蛋白，它的作用是調(diào)節(jié)放射狀膠質細胞的形態(tài)學排列，為提供了細胞的正確遷移方向以及可以使血管能正常發(fā)育。提示 Reelin蛋白的突變對細胞的發(fā)育造成了損傷，從而使皮質片層