ZAG通過(guò)P-AKT-GLUT4信號(hào)通路調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞胰島素抵抗的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：
　　探究鋅α2糖蛋白(Zinc-alpha2-glycoprotein,ZAG)對(duì)胰島素抵抗3T3-L1脂肪細(xì)胞的作用及基于P-AKT/GLUT4信號(hào)通路探討其可能的機(jī)制。
　　方法：
　　3T3-L1脂肪細(xì)胞通過(guò)體外培養(yǎng)5代，誘導(dǎo)分化成為成熟細(xì)胞，用油紅O染色法觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴情況。隨機(jī)分別予以生理鹽水、地塞米松注射液干預(yù)48h，即為空白對(duì)照組（N組）、胰島素抵抗模型組（IR組），IR組加入ZAG干預(yù)24h即為

2、ZAG組。ELISA方法測(cè)定各組細(xì)胞培養(yǎng)液上清中腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素6(Interleukin-6,IL-6)的含量；Western Blotting法測(cè)定各組細(xì)胞中脂聯(lián)素、瘦素、磷酸化絲氨/蘇氨酸激酶(Phosphorylated serine/threonine kinase,P-AKT)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4(glucose transporter4,GLUT4）蛋白表達(dá)水平

3、；RT-PCR方法測(cè)定脂聯(lián)素、瘦素、TNF-α、IL-6、AKT、GLUT4 mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　（1）脂聯(lián)素、瘦素蛋白及mRNA表達(dá)水平：IR組比N組脂聯(lián)素降低（P<0.05）， IR組比N組瘦素增高（P<0.05）；與IR組相比，ZAG組脂聯(lián)素蛋白及mRNA表達(dá)增高（P<0.05），瘦素蛋白及mRNA表達(dá)降低（P<0.05）。
　　（2） TNF-α、IL-6細(xì)胞上清液含量及mRNA表達(dá)水平：IR組

4、比N組TNF-α、IL-6細(xì)胞上清液含量增高（P<0.05）；與IR組相比，ZAG組TNF-α、IL-6細(xì)胞上清液含量及mRNA表達(dá)降低（P<0.05）。
　　（3）P-AKT蛋白與AKT mRNA的表達(dá)水平：IR組比N組降低（P<0.05）；與IR組相比，ZAG組P-AKT蛋白及AKT mRNA表達(dá)增高（P<0.05）。
　?。?）GLUT4蛋白與mRNA的表達(dá)水平：IR組比N組降低（P<0.05）；與IR組相比，ZAG組

5、GLUT4蛋白及mRNA表達(dá)增高（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　ZAG增高3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素蛋白及mRNA表達(dá)水平，降低瘦素、TNF-α、IL-6蛋白及mRNA表達(dá)水平，因此證實(shí)ZAG可以改善脂肪細(xì)胞胰島素抵抗，可能與其通過(guò)提高P-AKT/GLUT4信號(hào)通路中P-AKT水平進(jìn)一步提高GLUT4表達(dá)水平有關(guān)。
　　本課題為自然科學(xué)基金“山西省基礎(chǔ)研究項(xiàng)目―鋅α2糖蛋白參與調(diào)節(jié)胰島素抵抗機(jī)制研究（編號(hào)：2013