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文檔簡(jiǎn)介
1、背景和目的:冠心病在西方世界是人類(lèi)的主要死亡原因,在中國(guó),本病的發(fā)病率和患病率也呈逐年上升的態(tài)勢(shì)。心肌缺血是冠心病發(fā)病的主要機(jī)制。近半個(gè)世紀(jì)來(lái),心肌血運(yùn)重建術(shù)已經(jīng)成為治療冠心病主要方法。冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)自1960年以來(lái)在臨床實(shí)踐中使用,可以說(shuō)是有史以來(lái)進(jìn)行的最深入研究的手術(shù),而經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(PCI)應(yīng)用也已經(jīng)超過(guò)三十年,一直受到隨機(jī)臨床試驗(yàn)(RCTs)的關(guān)注和推崇。PCI是在1977年由Andreas Gruent
2、zig首次推出,到80年代中期則成為冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)的替代選擇。但在穩(wěn)定性心絞痛和非適應(yīng)癥冠脈病變中受到挑戰(zhàn)。另外,強(qiáng)化的生活方式和藥物管理。被大多數(shù)學(xué)者和臨床醫(yī)生稱(chēng)之為最佳的藥物治療(OMT)。但是,經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)(PTCA)和冠狀動(dòng)脈冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)(CABG)及最佳的藥物治療(OMT),也會(huì)在嚴(yán)重的多支病變的治療中,略顯不足,因此,需要開(kāi)發(fā)新的治療。利用蛋白質(zhì)或基因治療,促進(jìn)血管新生的方法。被大多數(shù)學(xué)者和臨床醫(yī)生稱(chēng)之為“治療性
3、血管新生”。眾所周知,血管生成和抑制因素可以共同努力來(lái)調(diào)節(jié)血管生成。但是更多的機(jī)制沒(méi)有被清楚地表明。更多的研究應(yīng)該進(jìn)一步探索機(jī)制。我們猜想他汀類(lèi)藥物可能會(huì)通過(guò)上調(diào)CD151的表達(dá)而對(duì)血管新生產(chǎn)生影響。為了測(cè)試我們的假設(shè)。我們采用大鼠心肌梗死模型,評(píng)估CD151和他汀類(lèi)藥物是否誘導(dǎo)心肌細(xì)胞形成新的毛細(xì)血管及它們之間的關(guān)系。
材料和方法:清潔級(jí)成年Sprague-Dawley(SD)健康大鼠100只。購(gòu)買(mǎi)自鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心
4、,合格證號(hào)為SCXK(豫):2009-0001,雌雄不拘,8周齡~12周齡,體重200克~400克,參照李應(yīng)東等的方法建立大鼠急性心肌梗死模型,100只大鼠縫扎左前降支動(dòng)脈,有66只大鼠存活,術(shù)后24小時(shí)采用隨機(jī)數(shù)字表法分為3組,每組22只,分別為模型組(Model group,MG)、假手術(shù)組(sham operated group,SOG)和阿托伐他汀組(Atorvastatin group,AG)。次日起阿托伐他汀干預(yù)組每同給予阿
5、托伐他汀鈣片10mg·kg-1·d-1連續(xù)灌胃6周,模型組及假手術(shù)組給予等量助溶溶劑連續(xù)灌胃6周。6周中每組各有2只動(dòng)物死亡,6周后處死動(dòng)物,取心肌組織進(jìn)行Ⅷ因子相關(guān)抗原(vWF)多克隆抗體免疫組化染色檢測(cè)心肌血管密度;RT-PCR方法檢測(cè)CD151mRNA表達(dá)水平。采用Western blot方法檢測(cè)CD151蛋白表達(dá)水平。應(yīng)用SPSS18.0軟件包(PASW Statistics18.0)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料的統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析
6、采用χ2檢驗(yàn)。計(jì)量資料以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,多組數(shù)據(jù)間比較用單因素方差分析(one-wayANOVA),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
結(jié)果:采用兔抗人Ⅷ因子相關(guān)抗原(vWF)多克隆抗體進(jìn)行心肌組織免疫組化染色結(jié)果顯示:阿托伐他汀組(3.99±0.52)vWF染色陽(yáng)性微血管計(jì)數(shù)較模型組(2.07±0.29)有明顯增加,模型組(2.07±0.29)較假手術(shù)組(1.83±0.22)也有明顯增加,單因素方差分析(one-w
7、ay ANOVA)顯示三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。兩兩比較顯示阿托伐他汀組、模型組和假手術(shù)組之間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.046<0.05);CD151mRNA RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示:阿托伐他汀組CD151mRNA表達(dá)水平(0.830±0.036)較模型組(0.317±0.028)和假手術(shù)組(0.302±0.045)有明顯增加,單因素方差分析(one-way ANOVA)顯示三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。兩兩比較
8、顯示阿托伐他汀組分別與模型組、假手術(shù)組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,模型組和假手術(shù)組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);Western blot免疫印跡檢測(cè)CD151蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果顯示:阿托伐他汀干預(yù)組CD151蛋白表達(dá)水平(0.410±0.025)較模型組(0.148±0.013)和假手術(shù)組(0.139±0.009)有明顯增加,單因素方差分析(one-wayANOVA)顯示三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。兩兩比較顯示阿托伐他汀組分別與模型
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