家蠶天然膜蛋白Bmb019518的分離純化.pdf

1、浙江理T大學(xué)碩士學(xué)位論文浙江理工大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：爵遺魄日期：2q7年千月2日浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要膜蛋白(特別是膜內(nèi)在

2、蛋白)在生物體與外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)和能量的交換以及信號傳遞等方面起著非常重要的作用。各種不同的質(zhì)膜蛋白在生物膜上以通道蛋白或載體蛋白等形式存在，是維持體內(nèi)穩(wěn)定內(nèi)環(huán)境的重要通道。它們不僅是調(diào)節(jié)細(xì)胞新陳代謝的重要參與者，而且在電子傳遞鏈中也有著重要的作用。膜蛋白約占細(xì)胞總蛋白的l／3左右，并且大部分膜蛋白是研究新藥的潛在靶點(diǎn)，是新藥研發(fā)的重要領(lǐng)域之一。天然內(nèi)膜蛋白存在于生物膜的脂類環(huán)境中，大多為疏水性的蛋白，應(yīng)用常規(guī)蛋白純化方法難以將其純化。

3、本文以家蠶桿狀病毒感染的蠶蛹為材料，通過感染初期病毒出芽將宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜剝離產(chǎn)生囊膜病毒，經(jīng)過勻漿、差速離心、密度梯度離心獲得帶囊膜病毒后，利用高壓破碎和超速離心等一系列技術(shù)手段而獲得較純的膜結(jié)構(gòu)后，采用兩性離子去垢劑(CHAPS)提取膜蛋白，利用AKTAexplorerl0蛋白純化系統(tǒng)進(jìn)行離子交換層析和凝膠過濾層析來分離家蠶膜蛋白，獲得的蛋白樣品經(jīng)過雙向電泳進(jìn)一步分離后，通過MAIDITOFMS獲得一種家蠶膜蛋白的肽質(zhì)量指紋圖譜(P