紫菜ACE抑制肽提取純化與結(jié)構(gòu)鑒定及飲料應(yīng)用研究.pdf

1、本文通過(guò)優(yōu)化壇紫菜的珠磨、酶解工藝，確定了提取紫菜多肽的最佳工藝；采用鹽析、凝膠層析、反相柱層析得到了三種物質(zhì)；通過(guò)解析核磁共振和質(zhì)譜數(shù)據(jù)確定了三種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)；通過(guò)優(yōu)化紫菜多肽原液的脫腥、殺菌工藝和配方，研制了一款紫菜多肽飲料，并對(duì)中試生產(chǎn)的成品飲料進(jìn)行感官檢驗(yàn)、理化檢驗(yàn)、微生物檢驗(yàn)，檢驗(yàn)結(jié)果符合生產(chǎn)要求和國(guó)標(biāo)要求；最后通過(guò)急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)證明了紫菜ACE抑制肽原液和紫菜多肽飲料的安全性。
　　通過(guò)測(cè)定蛋白質(zhì)含量和蛋白質(zhì)提取率來(lái)考

2、察料水比和珠磨時(shí)間對(duì)珠磨效果的影響，確定最佳珠磨工藝：料水比1:15，珠磨時(shí)間80 min；通過(guò)測(cè)定ACE抑制率來(lái)考察料水比、酶種類、復(fù)合酶組合種類及作用方式對(duì)酶解效果的影響，并進(jìn)行正交試驗(yàn)做最后的優(yōu)化，確定了最佳酶解工藝，二次酶解法：第一次酶解時(shí)，料水比為1:15，胰蛋白酶的酶解時(shí)間為2 h，添加量為2％，第二次酶解時(shí)，料水比為1:10，堿性蛋白酶的酶解時(shí)間為3 h，添加量為1%，酶解環(huán)境均為最適溫度和pH，此時(shí)酶解液的蛋白質(zhì)含量為1

3、.25%，蛋白質(zhì)提取率為85.22%，多肽原液ACE抑制率為93.5%。
　　通過(guò)硫酸銨梯度鹽析將經(jīng)珠磨、酶解處理而得的紫菜ACE抑制肽原液分成7個(gè)組分，分別進(jìn)行Sephadex G15凝膠層析共得到26個(gè)組分，篩選高ACE抑制活性組分進(jìn)行成分對(duì)比分析，并對(duì)其采用RP-C18柱層析進(jìn)一步分離純化，得到5個(gè)單一組分，結(jié)合核磁共振和質(zhì)譜分析技術(shù)鑒定出了3種氨基酸的結(jié)構(gòu)，即苯丙氨酸、異亮氨酸、亮氨酸。
　　通過(guò)感官評(píng)價(jià)來(lái)考察β－環(huán)

4、糊精對(duì)紫菜ACE抑制肽原液脫腥效果的影響，確定最佳脫腥工藝：β-環(huán)糊精添加量為1.5%；通過(guò)感官評(píng)價(jià)和微生物檢驗(yàn)來(lái)考察紫菜ACE抑制肽原液的殺菌效果，確定最佳殺菌工藝：120℃恒溫3 min；經(jīng)殺菌處理后，紫菜ACE抑制肽原液仍有較好的ACE抑制作用，說(shuō)明其ACE抑制作用具有較好的熱穩(wěn)定性；通過(guò)感官評(píng)價(jià)確定紫菜多肽飲料的配方，并對(duì)中試生產(chǎn)的成品進(jìn)行3項(xiàng)感官指標(biāo)、16項(xiàng)理化指標(biāo)、7項(xiàng)微生物指標(biāo)的檢驗(yàn)，均符合生產(chǎn)要求和國(guó)標(biāo)要求；通過(guò)急性經(jīng)口