萊克多巴胺適配體識(shí)別速測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、萊克多巴胺是一種具有苯乙醇胺類基本結(jié)構(gòu)的化學(xué)合成藥物，它通過(guò)抑制脂肪的合成提高瘦肉與脂肪的比率，增加飼料的轉(zhuǎn)換效率，提高肌肉質(zhì)量。但是如果動(dòng)物體內(nèi)攝入大量的萊克多巴胺，很難通過(guò)代謝排出體外，會(huì)使畜產(chǎn)品中萊克多巴胺的殘留超標(biāo)。萊克多巴胺通過(guò)食物鏈被人們食用后會(huì)出現(xiàn)肌肉振頗、頭疼、心慌、惡心、戰(zhàn)栗、嘔吐等不良癥狀，極大地危害人們的身體健康。因此，建立快速、準(zhǔn)確檢測(cè)畜產(chǎn)品中萊克多巴胺的方法意義重大。本論文建立了三種快速檢測(cè)萊克多巴胺的方法，主

2、要包括以下三個(gè)方面的工作:
　　1.基于適配體—膠體金可視化檢測(cè)萊克多巴胺
　　適配體的最佳濃度為5μmol/mL的條件下，考察了電解質(zhì)NaCl濃度、培育時(shí)間、培育溫度、溶液pH值對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，萊克多巴胺的檢測(cè)限可達(dá)10 ppb，線性范圍為0.01～400ng/mL，相關(guān)系數(shù)R2為0.997。對(duì)混合飼料進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，檢測(cè)線為10 ppb，線性范圍為0.01～0.4×103ng/mL，R2達(dá)到0.97

3、3，平均回收率為79.4～121.1％，重復(fù)檢測(cè)5次的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.415～4.475％，而且萊克多巴胺與沙丁胺醇和克倫特羅均無(wú)交叉反應(yīng)。
　　2.基于適配體復(fù)合膜電化學(xué)傳感器測(cè)定萊克多巴胺的研究
　　基于多壁碳納米管(MWCNTs)、L-精氨酸(P-L-Arg)、膠體金(AuNPs)和氨基修飾的適配體成功地構(gòu)建了RAC適配體電化學(xué)免疫傳感器?？疾炝藪呙杷俣?、培育溫度、培育時(shí)間、適配體修飾量以及pH值等條件對(duì)傳

4、感器響應(yīng)性能的影響。結(jié)果表明:該傳感器檢出限低、選擇性好。在優(yōu)化的條件下，其線性范圍為1.00×10-11～1.00×10-6 mol/L，R2達(dá)到0.980，檢出限為1.00×10-11 mol/L。該傳感器操作簡(jiǎn)單、性能穩(wěn)定，將其用于實(shí)際豬尿中萊克多巴胺的檢測(cè)，回收率為97.1％～103.0％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于9.4％。
　　3.基于巰基修飾的適配體電化學(xué)傳感器檢測(cè)萊克多巴胺
　　應(yīng)用功能化石墨烯(PDDA-GNs)、膠

5、體金(AuNPs)修飾電極獲得AuNPs/PDDA-GNs/GCE電化學(xué)免疫傳感器。通過(guò)自組裝作用將帶巰基的萊克多巴胺(RAC)適配體固定于電極表面，制得新型萊克多巴胺適配體電化學(xué)傳感器?？疾炝藪呙杷俣取⑴嘤郎囟?、培育時(shí)間、適配體修飾量以及pH值等條件對(duì)傳感器響應(yīng)性能的影響。結(jié)果顯示:該傳感器的線性范圍為1.00×10-12～1.00×10-7mol/L，線性相關(guān)系數(shù)R2達(dá)到0.996，檢出限低至1.00×10-12mol/L。該傳感器