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1、附件6動(dòng)物源性食品中克倫特羅、萊克多巴胺及沙丁胺醇的快速檢測(cè)膠體金免疫層析法1范圍本方法規(guī)定了動(dòng)物肌肉組織中克倫特羅、萊克多巴胺及沙丁胺醇的膠體金免疫層析快速檢測(cè)方法。本方法適用于豬肉、牛肉等動(dòng)物肌肉組織中克倫特羅、萊克多巴胺及沙丁胺醇的快速檢測(cè)。2原理本方法采用競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析原理。待測(cè)樣中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合,抑制了抗體和硝酸纖維素膜檢測(cè)線(T線)上抗原結(jié)合,從而導(dǎo)致檢測(cè)線顏色深淺變化。通過(guò)檢測(cè)

2、線與質(zhì)控線(C線)顏色深淺比較,對(duì)待測(cè)樣中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇進(jìn)行定性判定。3試劑與材料除另有規(guī)定外,本方法所用試劑均為分析純,水應(yīng)符合GBT6682二級(jí)水規(guī)定。3.1試劑3.1.1甲醇:色譜純。3.1.2氫氧化鈉。3.1.3磷酸二氫鉀。3.1.4磷酸氫二鈉。3.1.5鹽酸。3.1.6氯化鈉。3.1.7氯化鉀。3.1.8三氮化鈉。3.1.9乙二胺四乙酸二鈉。3.1.10三羥甲基氨基甲烷,即Tris。3.1.11乙酸乙酯?!?—

3、—2萊克多巴胺Ractopamine97825257C18H23NO3301.3803沙丁胺醇Salbutamol18559949C13H21NO3239.311注:或等同可溯源物質(zhì)。3.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.3.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:精密稱(chēng)取適量克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇參考物質(zhì)(3.2),分別置于100mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)溶解并稀釋至刻度,搖勻,分別制成濃度為100μgmL的克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,18℃保存

4、,有效期一年。3.3.2克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)中間液(1μgmL):精密量取克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100μgmL)(3.3.1)1mL置于100mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為1μgmL的克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)中間液,臨用新制。3.3.3克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)工作液(20ngmL):精密量取克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)中間液(1μgmL)(3.3.2)1mL,置于50mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為20ngmL的克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)

5、工作液。臨用新制。3.3.4萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)中間液(1μgmL):精密量取萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100μgmL)(3.3.1)1mL置于100mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為1μgmL的萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)中間液,臨用新制。3.3.5萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)工作液(20ngmL):精密量取萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)中間液(1μgmL)(3.3.4)1mL,置于50mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為20ngmL

6、的萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)工作液。臨用新制。3.3.6沙丁胺醇胺標(biāo)準(zhǔn)中間液(1μgmL):精密量取沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100μgmL)(3.3.1)1mL置于100mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為1μgmL的沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)中間液,臨用新制。3.3.7沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)工作液(20ngmL):精密量取沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)中間液(1μgmL)(3.3.6)1mL,置于50mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為20

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