草魚(yú)魚(yú)鰾膠原蛋白理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的研究.pdf

1、在加工草魚(yú)的過(guò)程中，大量的魚(yú)鰾被作為下腳料而廢棄。魚(yú)鰾中含有大量的膠原蛋白，并且基于其天然的低毒性、生物降解性、低免疫活性、保濕性和營(yíng)養(yǎng)性而廣泛地應(yīng)用于食品工業(yè)、化妝品、生物醫(yī)學(xué)材料等領(lǐng)域。本文從草魚(yú)魚(yú)鰾中提取膠原蛋白，研究其理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，為草魚(yú)魚(yú)鰾膠原蛋白的開(kāi)發(fā)和利用提供理論依據(jù)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴魚(yú)鰾中膠原蛋白含量的測(cè)定：采用羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)品擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，通過(guò)測(cè)定魚(yú)鰾中羥脯氨酸的含量來(lái)確定其膠原蛋白量，結(jié)果顯示魚(yú)

2、鰾中羥脯氨酸含量0.0497 g/g，膠原蛋白的含量約0.5518 g/g。選取醋酸、檸檬酸、胃蛋白酶、復(fù)合蛋白酶四種提取劑提取草魚(yú)魚(yú)鰾中的膠原蛋白，結(jié)果顯示用胃蛋白酶做提取劑效果較好，提取率達(dá)到16.65％。⑵魚(yú)鰾膠原蛋白提取工藝的優(yōu)化：在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，用響應(yīng)面對(duì)胃蛋白酶提取膠原蛋白過(guò)程中的液料比、加酶量、提取時(shí)間三個(gè)條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果顯示液料比為80 mL/g、加酶量40 mg/g、提取時(shí)間48 h時(shí)提取率最高，達(dá)到17.82

3、%。提取得到的膠原蛋白粗提液通過(guò)鹽析、復(fù)溶和透析三個(gè)步驟進(jìn)行純化得到純膠原蛋白。⑶魚(yú)鰾膠原蛋白理化性質(zhì)的研究：草魚(yú)魚(yú)鰾膠原蛋白的紫外光譜分析顯示在235 nm處有最大峰出現(xiàn)，表明魚(yú)鰾膠原蛋白中基本不含色氨酸和酪氨酸。紅外光譜分析表明吸收峰分別位于3325 cm-1、1653 cm-1、l235 cm-1及l(fā)078 cm-1處，表明草魚(yú)鰾膠原具有蛋白完整的三螺旋結(jié)構(gòu)。采用SDS-PAGE法分析草魚(yú)魚(yú)鰾膠原蛋白，電泳結(jié)果顯示其純度較高，由一

4、條α1鏈、一條α2鏈和一條β鏈組成，其中α1條帶遠(yuǎn)寬于α2條帶，其中可能含有α3，是典型的I型膠原蛋白。草魚(yú)魚(yú)鰾膠原蛋白的粘度隨著溫度的升高而減小，粘度實(shí)驗(yàn)顯示膠原蛋白變性溫度為29.4℃。采用示差掃描量熱法測(cè)得草魚(yú)魚(yú)鰾膠原蛋白的熱收縮溫度為42.11℃。氨基酸分析結(jié)果表明，甘氨酸含量很高，約占總氨基酸的21%，谷氨酸、丙氨酸、脯氨酸和賴(lài)氨酸的含量分別占總氨基酸的11.03%、12.41%、9.87%和3.12%，酪氨酸、組氨酸含量較低