2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、本文針對交聯(lián)酶聚體(Cross-linked enzyme aggregates,CLEAs)在制備及應(yīng)用上的兩類缺陷,即制備過程中沉淀步驟酶活損失大,催化大分子底物反應(yīng)時(shí)傳質(zhì)限制嚴(yán)重,分別提出了糖類添加劑改善CLEAs酶活及多孔化CLEAs改性兩種制備新方法,并將其應(yīng)用于分析化學(xué)與生物催化領(lǐng)域的三個(gè)體系,即蛋白組學(xué)分析中的胰蛋白酶酶解過程、青霉素?;该阜ê铣砂⒛髁?、木瓜蛋白酶酶法降解殼聚糖制活性低聚糖,具體結(jié)果如下:
  

2、 1.采用90%濃度乙醇為沉淀劑,0.075%戊二醛為交聯(lián)劑,以傳統(tǒng)方法制備得到了酶活收率為44%的胰蛋白酶CLEAs:胰蛋白酶CLEAs的最適催化溫度(70℃)、最適催化pH(9.0)、熱穩(wěn)定性和儲存穩(wěn)定性,均較游離酶有所提高;CLEAs“腳手架”狀微觀形貌決定了其優(yōu)良的穩(wěn)定性和高催化活性。
   2.將胰蛋白酶CLEAs用于蛋白組學(xué)的酶解肽譜分析中,有效防止了高酶濃度下胰蛋白酶的自水解;同時(shí)結(jié)合高溫輔助酶解、超聲輔助酶解可實(shí)

3、現(xiàn)高通量肽譜解析,分別縮短酶解時(shí)間至60min和60s,顯著提高了分析通量和序列覆蓋度。
   3.針對傳統(tǒng)青霉素?;窩LEAs制備過程中沉淀步驟酶活損失大的缺陷,設(shè)計(jì)了在有機(jī)沉淀步驟加入糖類添加劑以提高最終CLEAs酶活的新技術(shù),得到酶活收率為79.3%的青霉素?;窩LEAs,比傳統(tǒng)制備工藝酶活提高30%;揭示了糖類添加劑(如海藻糖)以“水替代”方式與酶蛋白結(jié)合,起到維持酶蛋白天然結(jié)構(gòu),保持CLEAs活性的作用機(jī)理。

4、>   4.將糖類添加劑改善的青霉素?;窩LEAs應(yīng)用于抗生素阿莫西林的酶法合成反應(yīng)中,考察了CLEAs對阿莫西林合成收率和選擇性的影響;引入30%甲醇介質(zhì)體系并在高底物比條件下反應(yīng),阿莫西林收率可達(dá)57%。
   5.針對傳統(tǒng)方式制備的木瓜蛋白酶CLEAs在催化大分子底物反應(yīng)時(shí)效率低的問題,提出以淀粉為致孔劑,在CLEAs內(nèi)部形成孔隙結(jié)構(gòu),制成多孔化CLEAs(p-CLEAs)的改進(jìn)技術(shù);將p-CLEAs應(yīng)用于大分子蛋白底

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