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文檔簡介
1、目的:應(yīng)用大鼠局灶性腦缺血再灌注模型研究無創(chuàng)遠(yuǎn)端肢體缺血后處理(NRIPoC)對(duì)大鼠腦缺血/再灌注損傷的影響,探討NRIPoC腦保護(hù)作用是否與JAK2-STAT3信號(hào)通路抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡有關(guān)。
方法:45只雄性SD大鼠隨機(jī)分成3組(n=15):假手術(shù)組(Sham組)、缺血再灌注組(I/R組)和無創(chuàng)遠(yuǎn)端肢體缺血后處理組(NRIPoC組)。①Sham組:大鼠僅分離頸部血管,不進(jìn)行大腦中動(dòng)脈梗阻。②I/R組:采用MCAO模型建立大鼠
2、局灶性腦缺血再灌注模型。③NRIPoC組:在MCAO90min后,大腦中動(dòng)脈再灌注開始即刻在大鼠右后肢根部用改良的自制血壓袖帶施行遠(yuǎn)端缺血處理,缺血5min及再灌注5min,共循環(huán)3次。三組大鼠在再灌注后觀察24h,并在24h時(shí)對(duì)大鼠行神經(jīng)功能缺陷評(píng)分(NDS);用TTC法測(cè)定腦梗死容積;HE染色法觀察腦組織形態(tài);Nissl染色法計(jì)數(shù)存活神經(jīng)細(xì)胞;TUNEL法計(jì)數(shù)缺血側(cè)皮層半影區(qū)凋亡細(xì)胞;免疫組化及Western Blot的方法觀察及測(cè)
3、定缺血側(cè)皮層半影區(qū)Bcl-2、Bax及p-STAT3蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:①TTC染色:Sham組未見腦梗死;與I/R組比較,NRIPoC組腦梗死容積顯著縮小。②HE染色:Sham組大腦皮層神經(jīng)元形態(tài)正常;與I/R組比較,NRIPoC組腦缺血半影區(qū)神經(jīng)細(xì)胞層次較清楚,數(shù)目多且細(xì)胞形態(tài)較完整,間質(zhì)水腫減輕;NRIPoC組和I/R組腦缺血核心區(qū)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目均稀少,核固縮深染,組織疏松。③Nissl染色:Sham組大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)
4、正常;NRIPoC組缺血半影區(qū)內(nèi)存活的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量比I/R組顯著增加。④TUNEL染色:I/R組及NRIPoC組缺血側(cè)腦皮層半影區(qū)凋亡細(xì)胞數(shù)量顯著多于Sham組;與I/R組相比,NRIPoC組缺血側(cè)腦皮層半影區(qū)細(xì)胞凋亡數(shù)顯著減少。⑤免疫組化及Western Blot結(jié)果:I/R組及NRIPoC組p-STAT3蛋白、Bcl-2蛋白及Bax蛋白在缺血區(qū)大腦皮層半影區(qū)的表達(dá)均顯著高于Sham組;與I/R組相比,NRIPoC組缺血側(cè)大腦皮層半影
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