5-氮雜脫氧胞苷對(duì)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231ER-,α-、E-cad表達(dá)和增殖侵襲能力的影響.pdf

1、目的：探討在乳腺癌細(xì)胞中，去甲基化藥物5-氮雜脫氧胞苷對(duì)雌激素受體α(estrogen receptor alpha，ERα)基因，上皮性鈣粘連素(E-cadherin，E-cad)基因表達(dá)的影響，及其對(duì)細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響，為乳腺癌的基因治療提供一定的指導(dǎo)意義。 方法：(1)使用去甲基化藥物5-氮雜脫氧胞苷處理MDA-MB-231細(xì)胞，利用細(xì)胞生長(zhǎng)曲線、MTT法及流式細(xì)胞儀檢測(cè)5-氮雜脫氧胞苷對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞增殖

2、和周期的影響；(2)通過RT-PCR和免疫組化檢測(cè)5.氮雜脫氧胞苷對(duì)ER Q陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231 ER α、E-cad及基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表達(dá)的影響；(3)通過Boyden小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)5-氮雜脫氧胞苷對(duì)乳腺癌細(xì)胞浸潤(rùn)能力的影響；(4)用限制性酶PCR檢測(cè)5-氮雜脫氧胞苷作用前后的乳腺癌細(xì)胞中ERα基因啟動(dòng)子及第一外顯子區(qū)域的甲基化情況。 結(jié)果：

3、(1)5-氮雜脫氧胞苷能使MDA-MB-23 1細(xì)胞的生長(zhǎng)速度明顯減慢，細(xì)胞周期被阻滯在G0/G1期；(2)5-氮雜脫氧胞苷部分恢復(fù)ER α陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞ERα及E-cad基因的表達(dá)；(3)5-氮雜脫氧胞苷使MDA-MB-231細(xì)胞中MMP-2基因表達(dá)下降，及該細(xì)胞的侵襲能力降低；(4)MDA-MB-231細(xì)胞ERα基因中檢測(cè)到HpaⅡ甲基化位點(diǎn)，5-氮雜脫氧胞苷作用后未檢測(cè)到甲基化位點(diǎn)。結(jié)論：(1)5-氮雜脫氧胞苷