XRCC1SNP與晚期NSCLC患者放療療效的關(guān)系.pdf

1、背景：
　　非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是嚴(yán)重威脅人類健康的惡性腫瘤之一，占肺癌總數(shù)的80-85％，屬于放射治療中度敏感的腫瘤。但是在臨床工作中，晚期NSCLC患者放療的療效往往不盡如人意，同樣病理類型的腫瘤組織對(duì)于放療的反應(yīng)也不盡相同,研究表明這種治療反應(yīng)上的差異可能與DNA損傷修復(fù)相關(guān)。在腫瘤治療過程中為了提高緩解率，延長(zhǎng)生存時(shí)間，往往會(huì)采用增加局部放射劑量的方式，而相應(yīng)地在

2、治療后出現(xiàn)皮膚、肺、食管等組織器官放射損傷的風(fēng)險(xiǎn)也大大增加。這種損傷在不同患者身上有截然不同的表現(xiàn)，臨床上尚缺少有效的預(yù)測(cè)手段，一旦出現(xiàn)放射性損傷往往難以逆轉(zhuǎn)，因此很多學(xué)者提出對(duì)于放射損傷的預(yù)防比治療更加重要，如何通過科學(xué)評(píng)估有效地增加放療敏感性，提高安全性是肺癌治療中亟待解決的熱點(diǎn)問題。
　　放射線主要通過單鏈斷裂(SSB)、雙鏈斷裂(DSB)、堿基損傷、DNA-DNA交聯(lián)和DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)等損傷機(jī)制導(dǎo)致DNA破壞，雙鏈斷裂是

3、其中最嚴(yán)重的形式，而堿基損傷和SSB最為多見。堿基切除修復(fù)(BER)途徑是此類DNA損害的主要恢復(fù)機(jī)制。這種機(jī)制不僅可能決定著放療的敏感性，也可能影響放射性損傷的嚴(yán)重程度。研究表明，在X射線損傷后DNA修復(fù)的過程中，人類X射線交叉互補(bǔ)修復(fù)基因（X-ray repair cross complementing gene1-9，XRCC1-XRCC9）是不可缺少的。XRCC1是DNA堿基切除修復(fù)/單鏈斷裂修復(fù)系統(tǒng)中的重要成分，作為第一個(gè)哺乳

4、動(dòng)物類影響細(xì)胞對(duì)電離輻射敏感性的基因，其編碼的蛋白質(zhì)主要以腳手架蛋白的形式連接聚合酶β、DNA連接酶Ⅲ和多聚ADP核糖聚合酶，從而在堿基切除修復(fù)和DNA單鏈斷裂修復(fù)過程中都發(fā)揮重要作用，由此可以推測(cè)XRCC1 SNPs對(duì)于DNA損傷修復(fù)的能力可能造成直接影響。通常認(rèn)為XRCC1等位基因的頻率是存在種族和地域差異的。已知的XRCC1基因編碼區(qū)的有價(jià)值的單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)有3個(gè)，分別為G28152A(Arg399G1n)、C26304T(Ar

5、g194Trp)和G27466A(Arg280His)。因Arg399Gln位點(diǎn)位于XRCC1蛋白與PARP結(jié)合的功能區(qū)內(nèi)，目前認(rèn)為蛋白質(zhì)功能主要受該位點(diǎn)多態(tài)性的影響。已有報(bào)道提出XRCC1 SNPs可能與多種腫瘤放療時(shí)發(fā)生正常組織放射性損傷程度有關(guān)，比如與鼻咽癌、乳腺癌以及頭頸部腫瘤的放射易感性和預(yù)后具有明顯關(guān)聯(lián)性，但其與NSCLC放射敏感性與安全性的關(guān)系目前尚缺乏文獻(xiàn)報(bào)道，越來越多的研究證實(shí)XRCC1基因多態(tài)性可能會(huì)影響腫瘤放射治療

6、易感性的差異，其臨床關(guān)聯(lián)研究有待進(jìn)一步深入。本研究通過檢測(cè)晚期NSCLC患者XRCC1單核苷酸多態(tài)性，評(píng)估亞洲人群晚期NSCLC患者的XRCC1等位基因頻率，為進(jìn)一步研究XRCC1基因在生理、病理發(fā)病機(jī)制中所起的作用提供理論依據(jù)，并通過分析不同XRCC1 Codon399基因型患者放療后3個(gè)月、6個(gè)月的腫瘤緩解程度以及出現(xiàn)的局部正常組織放射損傷，研究XRCC1 Codon399位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性與NSCLC患者放療效果與副作用的相關(guān)性

7、，從而為提高放射治療的敏感性和安全性提供臨床依據(jù)，優(yōu)化臨床治療評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，為預(yù)測(cè)放射性損傷提供一個(gè)新的思路。
　　材料與方法：
　　樣本選擇：研究選擇經(jīng)皮肺穿刺活檢（Percutaneous lung puncture biopsy，PNLB）病理確診為鱗癌、腺癌、腺鱗癌或大細(xì)胞癌患者60例，TNM分期為Ⅲ-Ⅳ期，2個(gè)月內(nèi)未接受任何放療或化療。
　　基因分型檢測(cè)：治療前1天取患者全血，以xTAG液相芯片技術(shù)檢測(cè)XRCC1

8、的G28152A(Arg399G1n)、C26304T(Arg194Trp)和G27466A(Arg280His)3種基因型，計(jì)算等位基因頻率，分析其與放療敏感性的關(guān)系。
　　臨床關(guān)聯(lián)性研究：進(jìn)一步比較腫瘤臨床病理特征與XRCC1 codon399 SNP的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者無(wú)密切關(guān)系。在放療結(jié)束后3個(gè)月，隨訪評(píng)價(jià)放療后腫瘤緩解率和急性放射性損傷發(fā)生率，在放療結(jié)束后6個(gè)月，隨訪晚期放射性損傷，尋找XRCC1 SNPs在放療敏感性

9、與安全性方面的預(yù)測(cè)作用。
　　數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析：構(gòu)成比資料采用非參數(shù)χ2檢驗(yàn)、計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)、配對(duì)資料采用Logistic回歸分析，并用年齡及性別校正。
　　結(jié)果：
　　隨訪結(jié)果提示，放療結(jié)束后3個(gè)月評(píng)估腫瘤緩解率，各基因組并無(wú)明顯差異。XRCC1 Codon399 Arg/Gln雜合子（61.11%）組患者發(fā)生急性放射性肺損傷的比例高于兩組純合子（32.26%，18.18%）（P<0.05）；Arg/Gln（72.

10、22%）和Gln/Gln組（72.73%）的患者在消化道損傷方面要高于Arg/Arg純合子組（38.71%）（P<0.05）。在皮膚、食管損傷以及白細(xì)胞、血小板等指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)顯著差異（P＞0.05）。放療后6個(gè)月隨訪，因部分患者已聯(lián)合化療或靶向治療，部分患者結(jié)合局部熱療或冷凍治療，放療療效受到干擾因素過多，無(wú)法進(jìn)行有效對(duì)比。在晚期放射性損傷方面，本研究發(fā)現(xiàn)Arg/Gln雜合子組（72.22%）患者發(fā)生晚期放射性肺損傷的比例高于兩組純合子（

11、67.74%，36.36%）（P<0.05）；Arg/Gln（27.78%）和Arg/Arg組（19.35%）的患者在心臟損傷上要高于Gln/Gln純合子組（9.09%）（P<0.05）。在皮膚、食管損傷方面未發(fā)現(xiàn)顯著差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　XRCC1 Codon399 SNP以及蛋白表達(dá)在食管癌、鼻咽癌、乳腺癌、頭頸部腫瘤放射治療中的療效及副作用的相關(guān)評(píng)價(jià)國(guó)內(nèi)外已有相關(guān)研究報(bào)道，結(jié)論尚存有爭(zhēng)議，多數(shù)研究將其

12、作為一個(gè)候選基因來預(yù)測(cè)放射治療的療效以及毒副作用，也有的學(xué)者觀察到了相反的結(jié)果，認(rèn)為其單核苷酸多態(tài)性與腫瘤放療敏感性的關(guān)系尚需要更多的證據(jù)支持。但不管如何，有一點(diǎn)是肯定的，就是在不同腫瘤接受放射治療后，不同的基因型能夠觀察到不盡一致的放射反應(yīng)，這些不同表現(xiàn)之間是否存在聯(lián)系是一個(gè)很有意思的問題。NSCLC患者的放射敏感性、安全性與放射損傷和XRCC1 SNPs的關(guān)系目前尚有較大的爭(zhēng)議，缺少大樣本的臨床研究報(bào)道。本研究選取的對(duì)象是Ⅲ-Ⅳ期N