中腦多巴胺獎(jiǎng)賞系統(tǒng)BDNF信號(hào)通路調(diào)控神經(jīng)病理性疼痛形成及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究發(fā)現(xiàn)中腦VTA-NAc神經(jīng)環(huán)路參與神經(jīng)病理性疼痛，但是其分子機(jī)制尚不清楚。本研究旨在探討VTA-NAc神經(jīng)環(huán)路BDNF是否介導(dǎo)神經(jīng)病理性疼痛形成及其調(diào)控機(jī)制。
　　方法：1為觀察VTA-NAc神經(jīng)環(huán)路中BDNF是否參與神經(jīng)病理性疼痛形成，對(duì)小鼠建立慢性壓迫性損傷模型(CCI)，應(yīng)用Western Blot方法檢測(cè)CCI術(shù)后1天，3天，7天，14天對(duì)側(cè)VTA和NAc BDNF表達(dá)變化。2為觀察VTA DA神經(jīng)元是否參與神經(jīng)

2、病性疼痛BDNF表達(dá)變化，于CCI術(shù)后7天對(duì)側(cè)VTA內(nèi)注射bacolfen或者DK-AH268，并采用Western Blot方法檢測(cè)給藥后對(duì)側(cè)NAc BDNF表達(dá)的變化。3為進(jìn)一步從行為學(xué)角度驗(yàn)證VTA釋放BDNF至NAc參與神經(jīng)病理性疼痛形成，分別對(duì)CCI術(shù)后7天小鼠于對(duì)側(cè)VTA和NAc注射藥物上調(diào)或下調(diào)VTA-NAc BDNF信號(hào)通路，并應(yīng)用熱輻射法觀察CCI小鼠痛行為的變化。4為觀察BDNF是否參與CCI小鼠對(duì)側(cè)潛在痛覺敏感化形

3、成，分別對(duì)CCI術(shù)后7天小鼠于同側(cè)VTA和NAc注射藥物，應(yīng)用熱輻射法觀察CCI小鼠對(duì)側(cè)肢體痛行為變化，并應(yīng)用Western Blot方法檢測(cè)同側(cè)VTA和NAc BDNF表達(dá)。
　　結(jié)果：1.CCI誘導(dǎo)神經(jīng)病理性疼痛條件下，對(duì)側(cè)VTA和NAc BDNF表達(dá)程時(shí)間依賴性改變。2.Baclofen(0.5 uM)或者DK-AH269(0.6 ug)通過抑制VTADA神經(jīng)元放電使神經(jīng)病理性小鼠NAc BDNF表達(dá)降低。3.對(duì)側(cè)VTA D

4、A神經(jīng)元釋放BDNF至NAc介導(dǎo)神經(jīng)病理性疼痛形成。對(duì)側(cè)NAc內(nèi)注射TrkB-Fc(20 ng)可以抑制CCI小鼠痛行為，而對(duì)側(cè)NAc注射BDNF(50 ng)可以逆轉(zhuǎn)對(duì)側(cè)VTA注射Baclofen(0.5 uM)或者DK-AH269(0.6 ug)對(duì)神經(jīng)病理性疼痛的鎮(zhèn)痛作用.為進(jìn)一步證明此結(jié)果，對(duì)側(cè)VTA內(nèi)注射Anisomycin(50 ug)抑制神經(jīng)病理性疼痛，而對(duì)側(cè)NAc內(nèi)注射BDNF(50 ng)可以逆轉(zhuǎn)其鎮(zhèn)痛作用。4.興奮同側(cè)

5、VTA DA神經(jīng)元放電釋放BDNF至NAc誘發(fā)CCI對(duì)側(cè)痛覺過敏。小劑量BDNF(5 ng)可以誘發(fā)CCI小鼠對(duì)側(cè)肢體痛覺過敏。同側(cè)NAc內(nèi)注射TrkB-Fc(20 ng)可以逆轉(zhuǎn)由同側(cè)VTA內(nèi)注射小劑量Baclofen(5 nM)或者M(jìn)orphine(30 nM)引起的痛覺過敏現(xiàn)象。同側(cè)VTA同時(shí)注射Anisomycin(50 ug)和小劑量Baclofen(5nM)可以抑制由單純同側(cè)VTA注射小劑量Baclofen（5nM）引起的痛