Simvastatin通過抑制RhoA-LIMK-cofilin通路緩解神經(jīng)病理性疼痛.pdf

1、碩士學(xué)位論文(專業(yè)學(xué)位)學(xué)校代碼：10023學(xué)號(hào)：$2013001099Simvastatin通過抑制RhoA／LIMK／cofilin通路緩解神經(jīng)病理性疼痛SimvastatinattenuatesneuropathicpainbyinhibitingtheRhoA／LIMK／cofilinpathway所院：姓名：指導(dǎo)教師：導(dǎo)OOd組：學(xué)科專業(yè)：研究方向：完成日期：北京協(xié)和醫(yī)院丘綢黃宇光虞雪融、許力、申樂、陳唯韞麻醉學(xué)疼痛機(jī)制201

2、6年5月3日Simvastatin通過抑制Rho刖LIMⅪcollilin通路緩解神經(jīng)病理性疼痛中文摘要【研究目的】神經(jīng)病理性疼痛是由神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性損傷和功能障礙所激發(fā)或引起的疼痛，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，一直是疼痛治療的難點(diǎn)。痛覺是多種機(jī)制綜合作用的結(jié)果，由于神經(jīng)病理性疼痛形成和維持的參與因素極其復(fù)雜，因此尋找安全有效治療藥物是急需解決的難題之一。RhoA／LIMK／cofilin是調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)和功能的一條重要信號(hào)通路，在細(xì)胞遷移、分化和

3、生存等方面起到重要作用，同時(shí)參與多種受體從高爾基體到細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)和活化，以及神經(jīng)元突觸結(jié)構(gòu)的重塑，從而與疼痛的級(jí)聯(lián)放大和慢性化轉(zhuǎn)變存在密切聯(lián)系。本研究提出RhoA／LIMK／cofilin通路通過對(duì)細(xì)胞骨架的改變，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)合成的痛覺相關(guān)受體向細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)從而參與神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生發(fā)展，并證實(shí)Simvastatin通過抑制該通路的活化、抑制肌動(dòng)蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)受體轉(zhuǎn)運(yùn)，緩解大鼠神經(jīng)病理性疼痛，為治療提供新的靶點(diǎn)?！狙芯糠椒ā繖z測(cè)CCI

4、神經(jīng)病理性疼痛大鼠DRG中RhoA／LIMK／cofilin通路的表達(dá)及活化情況——雄性SD大鼠，體重180—2009，采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為①正常對(duì)照組(Naive)(N=12)；②假手術(shù)組(Sham)(N=30)：進(jìn)行大鼠假手術(shù)，僅暴露雙側(cè)坐骨神經(jīng)不結(jié)扎；③坐骨神經(jīng)壓迫損傷組(CCI組)(N=30)：建立大鼠CCI模型。在建模后1、3、7、14及21天監(jiān)測(cè)3組大鼠機(jī)械刺激誘發(fā)痛、熱刺激誘發(fā)痛行為學(xué)指標(biāo)。實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)大鼠L4

5、—6DRG中RhoA和其效應(yīng)分子Rho激酶(Rhokinase，ROCK)的mRNA表達(dá)水平；Westernblot法檢測(cè)RhoA／LIMK／cofilin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中RhoA、pLIMK、P—cofilin蛋白表達(dá)水平變化以及RhoA蛋白在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜中表達(dá)比例的變化；免疫組化對(duì)RhoA定位檢測(cè)。干預(yù)RhoA／LIMK／cofilin通路表達(dá)，研究其對(duì)CCI神經(jīng)病理性疼痛大鼠疼痛行為學(xué)的影響及分子機(jī)制——雄性SD大鼠，體重1802