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文檔簡介
1、浙江大學博士學位論文小檗胺抗白血病作用及其機制的體外及體內實驗研究姓名:吳東申請學位級別:博士專業(yè):內科學(血液病學)指導教師:林茂芳2003.4.1浙江犬掌博士辯位論文捆’善48、72h對K562細胞的抑制率分別為2663%357%,6184%474%,7532%195%;對Jurkat細胞的抑制率分別為2677%530%,4448%4805%,7031%263%。HL60、NB4細胞對小檗胺同樣敏感,40、80、16。Opg/mlB
2、ER作用72h,對HL60細胞的抑制搴分別為4367%194%、S6,77%445%、7926%2。28%:對NB4細胞的搦制攀則分別為4607%3。72%、8521%0。78%、92。26%1。73%(與對照組超毖,P馕均O05)。上述4辨纓腿的72h半數靜鍘濃度島分剮為5227l。307pg/ml、3893l。207tg/ml、59261031pg/ml及37691319弘g/ml。經,j、檗胺霹正常骨髓單個核細穩(wěn)的抑稍俸蠲掇,j、
3、,8O嘲/mlBER作用72h的抑制率小于1o筠,Ic軸值為103650士10,257Dg/ml,約是上述白血病細胞株的175275倍。上述結果提示,小檠胺具有較廣譜的抗白血病細胞的作用,白血病細胞對小檗胺的敏感性明最地高予正常骨髓單個核細胞。本研究在光學顯微鏡及透視電鏡下均觀察到經小繁胺作用后的細胞具有典型的凋亡形態(tài)學改變;DNA電泳顯示典挺的“DNA梯形帶”;經漉式細胞儀檢測到明確的凋亡峰。與闋濃度點對照組相比,8。Olag/mlB
4、ER處理72hJ薹,K562細胞凋亡棗明顯地增加6177%435%啦050%014%,PO。01),露經譽同濃度BER俸翳24h壓,隧篝藥物濃度增加,烈亡攀也擺皮挺離,泰2Opg/mt維豹427%058%上舞至8O_tglml綴煞29,20%士382%。麓樣,在奪檗藏簸囂J薔的Jurkat及NB4緇戇中,氌梭測飄明確的凋亡峰。經8Opg/mlBER楚毽72h借,凋亡率分別商這6480%587%及6753%4_379%,與同濃度點對照緞相
5、比均有駐著性蒺異(PO01)。以上結果襲明,小檗胺除對已報道豹HL60細胞外,還能顯著地誘導其它類型的白血病細胞凋亡(如K562、Jurkat、NB4細胞),并呈明囂的濃度一時閫依賴關系。本研究通過RTPCR方法檢測Ks62、Jurkat細胞bax、bcl2、survivin及bcr/abl等凋亡楣關基因表達,采用Westernblotting方法檢測如s2綱黢BCR/ABL融合爨鑫矮P。農平。結果纛承,小紫騷作爝予Jurkat緞戇籍,
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