MSX1基因與非綜合征性唇腭裂的相關(guān)關(guān)系研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的： (1)檢測NSCL/P患者和正常人體中MSX1基因表達(dá)情況變化和基因突變位點(2)分析MSX1基因編碼區(qū)外顯子后端和3’端部分非編碼區(qū)的基因突變與中國山西部分人群NSCL/P發(fā)病相關(guān)性方法： 1．從山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院收集30例NSCL/P患者口腔裂隙處粘膜和30例正常人口腔粘膜做為對照組，用液氮迅速冷凍組織標(biāo)本，采用TAKARA公司提供的RNA提取試劑盒提取組織基因組RNA。 2．設(shè)計引物，采用RT-P

2、CR技術(shù)，以從組織中提取出的RNA為模板，根據(jù)中心法則的補(bǔ)充理論，反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，通過紫外成像系統(tǒng)記錄表達(dá)情況，進(jìn)行統(tǒng)計分析。 3．對擴(kuò)增出來的產(chǎn)物進(jìn)行測序，測定MSX1基因編碼區(qū)外顯子后端和3’端部分非編碼區(qū)的基因序列，對每個測序結(jié)果與Genbank數(shù)據(jù)庫中所提供的序列進(jìn)行比對，發(fā)現(xiàn)變異堿基位點并進(jìn)行定位，計算每個變異位點的頻率，采用病例對照研究對每個變異位點基因的頻率進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗。 結(jié)果： 1．對MS

3、X1基因表達(dá)水平研究發(fā)現(xiàn)，NSCL/P組中MSX1基因的表達(dá)水平(29.73±19.729)低于正常對照組(41.97±26.355)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.007<0.05)。 2．MSX1基因編碼區(qū)外顯子后端和3’端部分非編碼區(qū)的基因序列進(jìn)行擴(kuò)增，比較測序結(jié)果后，顯示有5個位點的變異具有統(tǒng)計學(xué)意義，包括X17(TT/TC886)P=0.000<0.05，X25(AA/AT904)P=0.000<0.05，X26(GG/G

4、A912)P=0.002<0.05，X29(GG/GA1389)P=0.011<0.05，X30(GG/GAA1389)P=0.000<0.05。單因素分析后，對有統(tǒng)計學(xué)意義的結(jié)果采用年齡對照1:1配對分組的Logistic回歸分析，最后AA/AT904，GG/GAA1389的B值分別是-3.738，-22.181。 結(jié)論： MSX1基因編碼區(qū)外顯子后端和3’端部分非編碼區(qū)的基因突變與中國山西部分地區(qū)非綜合征性唇腭裂發(fā)生

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