吡哆胺對(duì)高糖“代謝記憶”致糖尿病視網(wǎng)膜病變的治療作用.pdf

1、目的：研究吡哆胺對(duì)高糖“代謝記憶”致糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中AGEs和VEGF表達(dá)以及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響，探討吡哆胺對(duì)高糖“代謝記憶”致糖尿病視網(wǎng)膜病變是否有治療作用。
　　方法：將體重為200±20g的6周齡雄性SD大鼠（清潔級(jí)）隨機(jī)分為5組：正常組（NC組）、早期治療組（ET組）、吡哆胺治療組（PM組）、代謝記憶組（MM組）、糖尿病對(duì)照組(DM組)，每組10只。對(duì)早期治療組（ET組）、吡哆胺治療組（PM組）、代謝記憶組（MM組）、糖

2、尿病對(duì)照組(DM組)大鼠予單次腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)誘發(fā)為1型糖尿病；對(duì)正常（NC組）大鼠注射等量0.1mmol/L檸檬酸緩沖液（PH4.5）。
　　造模成功后，早期治療組（ET組）即予中長(zhǎng)效胰島素（優(yōu)泌林）頸背部皮下注射，每日早8時(shí)、晚8時(shí)各一次，單只總用量為6-8IU/D，每3日測(cè)一次血糖便于調(diào)整胰島素劑量，目標(biāo)血糖控制于10mmol/L以下；PM組予正常喂養(yǎng)，+200mg/kg吡哆胺灌胃（胰島素用量與用法同ET組）；M

3、M組予正常喂養(yǎng)，造模成功8周后，予每日皮下注射胰島素（胰島素用量與用法同ET組）；余大鼠予正常喂養(yǎng)。
　　16周后取材，取大鼠血清和眼球。用光鏡和電鏡觀察各組大鼠視網(wǎng)膜的超微結(jié)構(gòu)改變，用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記（TUNEL）法比較細(xì)胞凋亡的情況,用Elisa試劑盒對(duì)各組大鼠血清和視網(wǎng)膜組織晚期糖基化終末產(chǎn)物進(jìn)行定性和定量的檢測(cè)，用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)視網(wǎng)膜VEGF的蛋白含量變化。
　　結(jié)果：視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡

4、計(jì)數(shù)，NC組和ET組凋亡指數(shù)分別為（7.23±1.35，7.42±1.37）％，兩組相比無(wú)明顯差別（P﹥0.05），MM組和DM組凋亡指數(shù)分別為（37.36±3.30，36.45±5.00）%，兩組相比無(wú)明顯差別（P﹥0.05），但均高于NC組（P﹤0.05），PM組凋亡指數(shù)（21.86±1.94）%，與NC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05），但低于MM組和DM組（P﹤0.05）。血清檢測(cè)結(jié)果顯示：NC組和ET組血清AGEs含量無(wú)明

5、顯差別（P﹥0.05）；MM組和DM組血清AGEs含量明顯升高，兩組相比無(wú)明顯差別（P﹥0.05），但均高于NC組（P﹤0.05）；PM組大鼠血清AGEs含量與NC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05），但低于MM組和DM組（P﹤0.05）。視網(wǎng)膜組織AGEs含量檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)意義同血清檢測(cè)結(jié)果。VEGF免疫組織化學(xué)染色顯示：NC組和ET組平均光密度值分別為（7.38±1.52，7.02±1.58），兩組相比無(wú)明顯差異（P﹥0.05），

6、MM組和DM組平均光密度值分別為（27.57±4.24，27.66±5.02），兩組相比無(wú)明顯差別（P﹥0.05），但均高于NC組（P﹤0.05）。PM組平均光密度值為（15.41±2.35），與NC組和ET組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05），但低于MM組和DM組（P﹤0.05）。
　　結(jié)論：一定時(shí)間的高血糖狀態(tài)，可使糖尿病大鼠產(chǎn)生“代謝記憶”的現(xiàn)象，高糖“代謝記憶”在損害視網(wǎng)膜的機(jī)制中發(fā)揮重要作用。后期吡哆胺治療高糖“代謝記