拉帕替尼逆轉(zhuǎn)ER-α36介導(dǎo)的他莫昔芬耐藥的分子機制研究.pdf

1、目的：已有研究發(fā)現(xiàn)ER-α36可通過非經(jīng)典的雌激素膜信號傳導(dǎo)通路，使激素受體陽性的乳腺癌對內(nèi)分泌治療產(chǎn)生耐藥。拉帕替尼(Lapatinib)是一種小分子表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑，可通過阻斷下調(diào)信號抑制乳腺癌細胞增殖。本研究將探索拉帕替尼是否能通過下調(diào)ER-α36相關(guān)非經(jīng)典的雌激素膜信號傳導(dǎo)通路，逆轉(zhuǎn)激素受體陽性乳腺癌細胞的他莫昔芬（tamoxifen，TAM）耐藥，并初步探索其逆轉(zhuǎn)耐藥的分子機制，為乳腺癌內(nèi)分泌治療及靶向治療提供新的

2、理論支持。
　　方法：運用MTT、AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法流式細胞術(shù)、Western Blot等技術(shù)檢測經(jīng)拉帕替尼單藥或加用4-羥基他莫昔芬（4-hydroxy-tamoxifen，4OHT）處理后乳腺癌細胞株的增殖情況及相關(guān)蛋白水平的變化。
　　結(jié)果：⑴MTT檢測可發(fā)現(xiàn)拉帕替尼對ER陽性乳腺癌細胞存在明顯抑制作用，在MCF-7、MCF-7/ER-α36兩細胞系中，存在劑量依賴效應(yīng);⑵AnnexinⅤ-FITC

3、/PI雙染法流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)拉帕替尼可顯著增強4OHT誘導(dǎo)激素受體陽性、ER-α36過表達的乳腺癌細胞凋亡（P＜0.001）;⑶拉帕替尼預(yù)處理或與4OHT聯(lián)合作用均可加強凋亡起始、執(zhí)行階段關(guān)鍵Caspase家族蛋白剪切活化、抑制抗凋亡Bcl-2蛋白表達，下調(diào)細胞周期正性調(diào)控蛋白CyclinD1、Cyclin D3、CDK2、CDK4等的表達;⑷拉帕替尼顯著抑制ER-α36相關(guān)非經(jīng)典的雌激素膜信號傳導(dǎo)通路中Akt T308位點及S6K1