肝X受體通過調(diào)控GLUT-4減輕大鼠心肌缺血-再灌注損傷.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  通過建立離體灌流心臟,復制缺血再灌注模型,在離體灌流心臟水平觀察肝X受體(LXRs)對心肌缺血再灌注(I/R)損傷的影響;探討LXRs是否通過調(diào)控葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT-4)減輕大鼠離體心臟I/R損傷。
  方法:
  1、應用Langendorff裝置建立大鼠離體灌流心臟,并復制心肌I/R損傷模型:離體心臟在停灌30分鐘后,再灌注120分鐘;
  2、實驗分組:(1)control組:使用正常

2、K-H液灌注。(2)control+DMSO(二甲基亞砜)組:使用 DMSO預處理。(3) I/R組:停灌30分鐘,再灌注120分鐘。(4) I/R+0.1μmo l/L T0901317(肝X受體激動劑)組:使用0.1μmo l/L T0901317預處理。(5)I/R+0.5μmol/L T0901317組:使用0.5μmol/L T0901317預處理。(6)I/R+1.0μmo l/L T0901317組:使用1.0μmo l/

3、L T0901317預處理。(7)缺血預處理組:停灌5分鐘,復灌流5分鐘,進行4個循環(huán)后,停灌30分鐘后,再灌注120分鐘。
  3、常規(guī)比色法檢測乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性、使用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法計算心臟心梗面積,評估I/R損傷程度;
  4、應用多導生理記錄儀監(jiān)測血流動力學指標:左室舒張末壓(LVEDP)、左室發(fā)展壓(LVDP)、左室內(nèi)壓力變化速率(±dp/dtmax)、冠脈流量(CF);

4、
  5、應用實時定量PCR檢測葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白-4(GLUT-4)mRNA的表達;Western blot檢測大鼠心肌細胞膜上GLUT-4蛋白的含量。
  結(jié)果:
  1、各實驗組在缺血30min,再灌注120min后心肌受到損傷,LDH、CK活性及心梗面積均增加(P<0.05),并產(chǎn)生血流動力學障礙:CF、LVDP、±dp/dtmax明顯減小(P<0.05),LVEDP明顯增大(P<0.05),使用DMSO預處理組無

5、明顯改變(P>0.05);
  2、T0901317預處理組及IPC組顯著降低了I/R損傷后CK、LDH的活性;T0901317處理后組及IPC組的心梗面積較單純I/R組明顯減小(P<0.05);
  3、T0901317處理后組及IPC組明顯改善因I/R損傷引起的血流動力學障礙:增加CF、LVDP、±dp/dtmax(P<0.05),降低LVEDP(P<0.05);
  4、T0901317及IPC預處理進一步增加由

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