牙乳頭干細(xì)胞分離、培養(yǎng)的研究.pdf

1、目的:探討從人未發(fā)育完全的前磨牙牙根尖部牙乳頭中分離、培養(yǎng)牙乳頭干細(xì)胞的方法,以期為組織工程在牙體及牙髓組織再生領(lǐng)域的應(yīng)用找到更好的細(xì)胞來(lái)源。
　　 方法:取10至13歲接受正畸治療的患者獲取拔除的前磨牙；使用挖勺在尚未形成根尖的牙根部分離牙乳頭組織；采用組織塊貼壁培養(yǎng)法從牙乳頭組織中分離出牙乳頭干細(xì)胞,并計(jì)算細(xì)胞集落形成率；應(yīng)用免疫熒光、流式細(xì)胞儀檢測(cè)牙乳頭干細(xì)胞的標(biāo)記物。
　　 結(jié)果:組織塊培養(yǎng)獲得的第二代牙乳頭干細(xì)

2、胞在體外集落形成率為10～20colonies/103細(xì)胞；牙乳頭干細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),呈長(zhǎng)梭形或多角形,核漿比大；原代培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢(約35天傳代),傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)快(3-5天一代),可連續(xù)傳12代以上；牙乳頭干細(xì)胞堿性磷酸酶陽(yáng)性率為33.2％、巢蛋白陽(yáng)性率為96.8％、波形蛋白陽(yáng)性率為93.9％、Stro-1陽(yáng)性率為48.5％、CD90陽(yáng)性率為92.1％,但牙本質(zhì)涎蛋白為陰性(<1％)。
　　 結(jié)論:使用組織塊貼壁培養(yǎng)法能夠有