熒光原位雜交技術(shù)在嗜酸粒細(xì)胞增多疾病及骨髓增生異常綜合征中診斷作用的研究.pdf

1、第一部分：
　　 嗜酸粒細(xì)胞增多疾病的細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)特征的研究
　　 研究目的：
　　 本研究旨在探討嗜酸粒細(xì)胞增多疾病患者的細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)特征。
　　 研究方法：
　　 通過間期熒光原位雜交(FISH)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)的方法對(duì)79例嗜酸粒細(xì)胞增多（嗜酸粒細(xì)胞計(jì)數(shù)≥1.5×109/L）患者的血小板衍生生長因子受體(PDGFR)A、PDGFRB和纖維母細(xì)胞生長因

2、子受體(FGFR)1基因重排進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)44例患者的T細(xì)胞受體(TCR)基因重排進(jìn)行了檢測(cè)。
　　 結(jié)果：
　　 79例患者中檢出FIP1L1/PDGFRA(F/P)融合基因陽性19例，檢出CHIC2缺失19例，檢出PDGFRB基因重排4例，未檢測(cè)到FGFR1基因重排患者。按照2008年WHO分類修訂診斷后，有42％(20/48)的高嗜酸粒細(xì)胞綜合征(HES)和83%(5/6)的慢性嗜酸粒細(xì)胞白血病(CEL)患者更正診

3、斷為伴PDGFRA/B重排的髓系腫瘤，17%(1/6)的CEL更正診斷為慢性嗜酸粒細(xì)胞白血病，非特指型(CEL-NOS)。染色體核型分析檢出克隆性細(xì)胞遺傳學(xué)異常4例，1例為CEL-NOS,3例為伴PDGFRB重排的髓系腫瘤，所有21例伴PDGFRA重排的患者均未檢測(cè)出4q12異常。伴PDGFRA／B重排的髓系腫瘤、HES和繼發(fā)性嗜酸粒細(xì)胞增多三組患者的克隆性TCR基因重排檢出率分別為33%(5/15)、40%(6/15)和36%(5/1

4、4)，三組間無明顯差異。
　　 結(jié)論：
　　 在既往診斷HES和CEL的患者中存在較高比例的PDGFRA/B基因重排，通過間期FISH和PCR方法可以提高伴PDGFRA/B重排的髓系腫瘤的診斷。
　　 第二部分：
　　 高嗜酸粒細(xì)胞綜合征及伴血小板衍生生長因子受體重排的髓系腫瘤患者的臨床特征及療效分析
　　 研究目的：
　　 分析HES和伴PDGFR重排的髓系腫瘤的臨床特征以及療效。

5、>　　 研究方法：
　　 我們分析了2005年9月至2011年3月就診我院的84例嗜酸粒細(xì)胞增多患者的臨床特征及治療反應(yīng)，其中包括了45例HES患者和39例伴PDGFR重排的髓系腫瘤患者。
　　 結(jié)果：
　　 我們對(duì)HES和伴PDGFR重排的髓系腫瘤患者的臨床特征進(jìn)行了比較，伴PDGFR重排患者的血紅蛋白水平和血小板計(jì)數(shù)明顯低于HES患者，而肝脾腫大和骨髓纖維化的發(fā)生率及血清維生素B12水平均明顯高于HES患者

6、。糖皮質(zhì)激素治療45例HES患者，誘導(dǎo)治療中位劑量為潑尼松30mg／日，維持治療的中位劑量為潑尼松10mg／日，中位隨訪13個(gè)月，治療總有效率為91%。19例F/P融合基因陽性患者接受了伊瑪替尼治療，用藥后中位隨訪23個(gè)月，90%(17/19)達(dá)到了完全血液學(xué)緩解(CHR)，獲得CHR的中位時(shí)間為2周，92%(12/13)達(dá)到了完全分子學(xué)緩解(CMR)，獲得CMR的中位時(shí)間為4個(gè)月。7例患者應(yīng)用維持量大于100mg/周，中位隨訪23個(gè)月

7、內(nèi)未發(fā)現(xiàn)分子學(xué)復(fù)發(fā)，中位CMR持續(xù)時(shí)間為18個(gè)月。4例停藥患者全部出現(xiàn)血液學(xué)復(fù)發(fā)，最長的復(fù)發(fā)時(shí)間是停藥后50個(gè)月。
　　 結(jié)論：
　　 伴PDGFR重排的髓系腫瘤是一組有明顯骨髓增殖性腫瘤(MPN)特點(diǎn)的疾病。伊瑪替尼治療劑量100mg／日可以有效的誘導(dǎo)F/P融合基因陽性患者緩解，100mg／周也可以維持疾病長期緩解。
　　 第三部分：
　　 FISH在骨髓增生異常綜合征細(xì)胞遺傳學(xué)評(píng)估中作用的研究

8、　　 研究目的：
　　 研究骨髓及外周血FISH檢測(cè)在骨髓增生異常綜合征(MDS)細(xì)胞遺傳學(xué)評(píng)估中的作用。
　　 研究方法：
　　 前瞻性對(duì)比了112例初診MDS患者的常規(guī)染色體核型分析和骨髓FISH檢測(cè)結(jié)果，同時(shí)對(duì)56例患者骨髓及外周血FISH結(jié)果進(jìn)行了比較。
　　 結(jié)果：
　　 在41例檢出克隆性異常核型的病例中，有22例骨髓FISH檢測(cè)與核型分析結(jié)果不完全一致，16例是由于探針組合不能覆蓋

9、異常染色體區(qū)段所致，而涉及到探針檢測(cè)位點(diǎn)的不同僅有6例，F(xiàn)ISH檢測(cè)結(jié)果并未改變這6例患者的細(xì)胞遺傳學(xué)預(yù)后分組。在71例未檢出克隆性異常核型的病例中，15例(21%)通過骨髓FISH檢出異常，在＜20個(gè)分裂相和≥20個(gè)分裂相的病例中FISH異常檢出率分別為27%(14/51)和5%(1/20)。72%(21/29)的骨髓FISH異常病例同時(shí)檢出外周血異常,4%(1/27)的骨髓FISH結(jié)果正常病例外周血檢出異常。
　　 結(jié)論：<