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1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文肝細(xì)胞癌中ZHX2對AFP表達(dá)調(diào)控的研究姓名:胡少為申請學(xué)位級別:博士專業(yè):病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師:文劍明20070528中山大學(xué)博士學(xué)位論文肝細(xì)胞癌中ZHX2對AFP表達(dá)調(diào)控的研究持續(xù)升高的BALB/c/J成年小鼠肝組織中ZHX2第一內(nèi)含子內(nèi)有逆轉(zhuǎn)錄病毒的插入,ZHX2基因轉(zhuǎn)錄異常進而表達(dá)降低。綜上所述,我們可以得出以下結(jié)論:ZHX2負(fù)性調(diào)控BALB/c/J成年小鼠肝組織AFP基因的表達(dá)。酵母雙雜交和免疫共沉淀
2、實驗證明ZHX2能與NFYA(nuclearfactorYA)結(jié)合發(fā)揮轉(zhuǎn)錄抑制功能。NFYA是NFY的一個亞單位,NFY是一個廣泛存在于真核細(xì)胞的調(diào)控因子,包含三個亞單位:NFYA、NFYB和NFYC。NFYB和NFYC相互作用形成二聚體,然后結(jié)合NFoYA形成三聚體,從而再與DNA啟動子區(qū)的CCAATbox結(jié)合,調(diào)控相應(yīng)基因的表達(dá)。NFY的三個亞單位不僅能夠形成三聚體與靶基因相結(jié)合,而且可以與非DNA結(jié)合蛋白相互作用協(xié)同調(diào)節(jié)NFY對靶
3、基因的調(diào)控作用。2003年,Kawata等人的研究證明ZHX2能夠負(fù)性調(diào)控NFY下游基因cde25C的表達(dá)。由此,我們可以推測ZHX2可以與NFYA相互作用來負(fù)性調(diào)控NFY下游基因的表達(dá)。目前已知ZHX2能夠負(fù)性調(diào)控成年小鼠肝組織AFP的表達(dá),那么ZHX2在人類HCC組織中的作用如何,它是否也參與了人類AFP基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控,NFYA是否也參與了這一調(diào)控過程呢針對以上問題,我們設(shè)計了本實驗。全文分為三章:一、肝細(xì)胞癌中ZHX2mRNA及蛋
4、白表達(dá)的檢測本實驗檢測了63例HCC及對應(yīng)的癌旁非腫瘤組織中ZHX2mRNA的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)ZHX2mRNA的表達(dá)率在HCC及癌旁非腫瘤組織中無顯著性差異。采用組織芯片和免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測了肝組織中ZHX2蛋白的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)在正常肝組織、肝硬化組織及癌旁非腫瘤組織中均未檢測到ZHX2蛋白的表達(dá),在HCC組織中ZHX2蛋白的表達(dá)率為195%。ZHX2蛋白在IIIIV級HCC組織中的表達(dá)率為313%,明顯高于III級組織中的表達(dá)率(16
5、5%)。ZHX2蛋白在發(fā)生轉(zhuǎn)移的HCC組織中的表達(dá)率(247%)明顯高于無轉(zhuǎn)移組織中的表達(dá)率(168%);在轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)率(455%)也明顯高于原發(fā)灶中的表達(dá)率(242%)。通過對HCC組織中ZHX2蛋白的表達(dá)情況與術(shù)前血清AFP水平進行配對比較,發(fā)現(xiàn)ZHX2蛋白在血清AFP正常的HCC組織中的表達(dá)率為379%,明顯高于血清AFP20I_tg/L組織的表達(dá)率(136%);通過統(tǒng)計分析,發(fā)現(xiàn)ZHX2蛋白與血清AFP呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。二、肝細(xì)
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