山女鱒源致病性水霉菌的分離鑒定及其特性研究.pdf

1、山女鱒（Oncorhynchus masou masou）自引入我國并成功的完成人工繁育以來，基于其味道鮮爽，肉質(zhì)細(xì)滑，營養(yǎng)價值高及具有保健作用等優(yōu)點，深受消費者們的青睞，因此在我國具有廣闊的市場前景。近年來，隨著山女鱒養(yǎng)殖規(guī)模和人工養(yǎng)殖技術(shù)的不斷壯大及快速發(fā)展，頻發(fā)的各種病害常常造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。尤其是水霉病，由于其發(fā)病迅速，感染范圍廣，死亡率高而給山女鱒產(chǎn)業(yè)帶來了極大困擾并且嚴(yán)重阻礙了其持續(xù)發(fā)展。
　　本實驗分離純化一株山女

2、鱒源致病性水霉菌株，通過形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)相結(jié)合的方法對其進(jìn)行鑒定，并進(jìn)行了人工感染魚卵的實驗，研究了不同生長條件對菌株生物學(xué)特性的影響和藥物防治水霉菌感染的效果。為水霉菌生物學(xué)特性及山女鱒水霉病的防治提供理論基礎(chǔ)。實驗結(jié)果如下:
　　1.采用傳統(tǒng)的方法分離純化一株水霉菌株，將其命名為SN。通過附著在油菜籽上水霉菌絲的形態(tài)，觀察到其菌絲分枝較少，呈透明管狀，無橫隔;菌絲頂端可生成棒狀孢子囊，內(nèi)部產(chǎn)生游動孢子，游動孢子成熟后，便

3、從孢子囊中迅速釋放出，而新孢子囊以層出方式或側(cè)生出芽方式發(fā)生。在一定的生長條件下，菌絲頂端或中間可見球形或不規(guī)則形狀的厚垣孢子。當(dāng)生長環(huán)境良好時，可產(chǎn)生藏卵器和雄器進(jìn)行有性繁殖。這些形態(tài)特征與水霉屬水霉的形態(tài)基本相似。
　　2.此SN菌株的ITS rDNA序列與GenBank中水霉屬鮭水霉(GenBank登錄號為EU551152)的親緣關(guān)系最接近。因此，推斷菌株SN為鮭水霉（Saprolegnia salmonis），GenBan

4、k登錄號為KJ579137。
　　3.通過將山女鱒魚卵暴露于不同濃度的SN孢子懸液中，研究SN菌株的感染率，發(fā)現(xiàn)魚卵感染水霉病主要是通過水體中的孢子侵染導(dǎo)致的。孢子附著在魚卵上，并可在魚卵之間傳播;且水霉病的感染率均隨著養(yǎng)殖水體中孢子濃度的增加而升高，當(dāng)初始濃度為1×105個/ml時，感染率最高達(dá)到82％，并且高濃度組與低濃度組之間差異顯著。
　　4.通過在不同條件下對菌株SN的生物學(xué)特性影響的實驗，適宜菌株SN生長的溫度范

5、圍為10～30℃，適宜生長的pH范圍在5～11;最適生長溫度為25℃，最適生長pH為8;菌株SN對NaCl較為敏感，在鹽度范圍為0.5％～2％內(nèi)菌株雖可生長，但是隨著鹽度的升高菌株的生長明顯受到抑制。
　　5.本實驗選用過氧化氫、甲醛、孔雀石綠、檢科Ⅰ號等6種抗水霉制劑對水霉菌株SN孢子生長的影響進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)高濃度的各抗水霉制劑對SN抑制率高;并且過氧化氫和甲醛抑孢子的效果優(yōu)于孔雀石綠，而檢科Ⅰ號、亞硝酸鈉和過氧乙酸的抑制效果不