雌二醇,孕酮對(duì)MA891乳腺癌細(xì)胞侵襲和遷移的影響及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、目的
　　本研究探討雌二醇(estradiol,E2),孕酮(progesterone,P)對(duì)MA891乳腺癌細(xì)胞侵襲和遷移能力影響,以及對(duì)MA891乳腺癌細(xì)胞表達(dá)FGF1、FGFR1、MMP2和MMP9表達(dá)的影響,從而初步分析MA891乳腺癌細(xì)胞侵襲及遷移的機(jī)制。
　　方法
　　1.從荷瘤TA2小鼠取出腫瘤組織,原代培養(yǎng)TA2小鼠自發(fā)性乳腺癌MA891細(xì)胞(TA2MA891),待穩(wěn)定傳代后建立起MA891乳腺癌細(xì)胞系

2、。將MA891乳腺癌細(xì)胞接種于正常TA2小鼠皮下,觀察腫瘤生長(zhǎng)情況。
　　2.劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell小室法檢測(cè)E2、P二者單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)MA891乳腺癌細(xì)胞侵襲和遷移的影響。
　　3.細(xì)胞免疫組化觀察MA891乳腺癌細(xì)胞在E2、P二者單獨(dú)及聯(lián)合作用下FGF1、FGFR1、MMP2、MMP9表達(dá)。
　　4.運(yùn)用Image-ProPlus6.0圖像分析軟件進(jìn)行免疫組化圖片光密度分析,以平均光密度(averageop

3、tical,AOD)值代表免疫組化染色的強(qiáng)度作為觀察指標(biāo)。運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理數(shù)據(jù)結(jié)果。數(shù)據(jù)結(jié)果采用單因素方差分析(onewayANOVA),進(jìn)一步用LSD法進(jìn)行多組間比較。P<0.05時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.皮下接種MA891乳腺癌細(xì)胞的10只小鼠,均在接種后18天內(nèi)出現(xiàn)明顯腫瘤生長(zhǎng)。
　　2.E2、P及二者聯(lián)合對(duì)MA891乳腺癌細(xì)胞遷移侵襲的影響。
　　劃痕實(shí)驗(yàn)和Trans

4、well小室法檢測(cè)顯示,E2、P能使MA891細(xì)胞遷移和侵襲能力產(chǎn)生顯著影響,通過(guò)人工基底膜的MA891乳腺癌細(xì)胞數(shù)量較對(duì)照組明顯增加(P<0.01)。
　　E2增加MA891細(xì)胞遷移和侵襲能力(P<0.01,P<0.05)。
　　P增加MA891細(xì)胞遷移和侵襲能力(P<0.01,P<0.05)。
　　E2+P共同作用下MA891細(xì)胞遷移和侵襲能力較單純E2及單純P作用下高(P<0.05)。
　　4.E2、P及二

5、者聯(lián)合對(duì)MA891乳腺癌細(xì)胞表達(dá)FGF1、FGFR1、MMP2、MMP9的影響。細(xì)胞免疫組化顯示:E2能使MA891乳腺癌細(xì)胞表達(dá)FGF1、FGFR1、MMP2、MMP9上調(diào)。較正常對(duì)照組差異對(duì)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05)。
　　P能使MA891乳腺癌細(xì)胞表達(dá)FGF1、FGFR1、MMP2、MMP9上調(diào)。較正常對(duì)照組差異對(duì)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.